陈 博，汪玲果，蔺鹏桢

    颅内动脉瘤是一种严重的神经系统疾病，病人生存率低且预后差。一般认为颅内动脉瘤是由血管畸形引起的，颅内动脉瘤患病率约为3.2%[1]。除有颅内动脉瘤的家族史外，其他一些因素(吸烟、高血压和过量饮酒)也会影响颅内动脉瘤形成和生长。有研究显示，内在因素如血管细胞功能障碍、血管壁退行性变化、炎症和免疫反应在颅内动脉瘤的发展中发挥一定的作用[2]。Krüppel样转录因子(Krüppel-like factor，KLF)在哺乳动物中有17个成员，介导各种重要的生理和病理过程。Krüppel样转录因子2(Krüppel-like factor 2，KLF2)通常在内皮细胞表达，调节细胞形态和周期[3]。KLF2在动脉粥样硬化研究中被广泛应用，并可调节内皮细胞的多个基因表达，包括内皮素、内皮型一氧化氮合酶和基质金属蛋白酶(MMP)等[4]。血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells，VSMCs)可能具有较大的表型变化，如从收缩相关的细胞变为对环境刺激具有基质重塑的细胞[5]。有研究显示，颅内动脉瘤的形成涉及血管平滑肌解离，因此，认为血管平滑肌的增殖和迁移是颅内动脉瘤发病机制的关键[6]。然而关于KLF2在颅内动脉瘤中的研究较少。本研究首先检测KLF2在颅内动脉瘤组织中的表达，利用shRNA转染VSMCs以构建KLF2低表达的稳定细胞株，观察沉默KLF2对VSMCs增殖、迁移、自噬及表型调节的影响，为KLF2在颅内动脉瘤进展中的作用及其作为新的治疗靶标提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 临床组织标本的采集 收集我院同期收治的且行开颅夹闭术的颅内动脉瘤病人20例，其中男14例，女6例，年龄(40.38±3.14)岁；所有病人经数字减影血管显像技术明确诊断为颅内动脉瘤。另选取同期因颞叶癫痫切除的颞叶皮层动脉血管组织20例病人，其中男16例，女4例，年龄(39.65±6.71)岁；术后组织病理检查为正常动脉组织。颅内动脉瘤病人和颞叶癫痫病人性别、年龄比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。所有病人术前均签署知情同意书。

    1.1.2 主要试剂 DMEM培养基和胎牛血清(FBS)购自美国Gibco公司；pcDNA3.1/NC、pcDNA3.1/KLF2、shNC和shKLF2购自上海吉玛制药技术有限公司；TRIzol试剂、PrimeScriptTM1st Strand cDNA Synthesis试剂盒和TB GreenTMPremix Ex Taq Ⅱ试剂盒购自日本TaKaRa公司；LipofectamineTM3000购自美国Invitrogen公司 ......