何秀芳，谭诚成，李圣永

    随着人们生活水平的提高，心血管疾病的发病率呈不断升高趋势，严重威胁人类的健康[1]。大部分研究认为，各种心血管疾病危险因素都源自血管内皮细胞损伤，血管内皮细胞发生损伤后，可引起血管壁的生理病理变化，最终导致一系列的心血管疾病[2-3]。因此，有效保护血管内皮细胞对于心脑血管疾病的防治具有重要意义。高同型半胱氨酸(Hcy)是心血管疾病的独立危险因素，Hcy可通过诱导血管氧化应激反应，从而引起内皮发生功能障碍[4]。研究表明，Hcy可引起血管内皮细胞损伤[5]。脉络宁注射液是中西医结合方法研究出的中药复方注射液，由牛膝、金银花、石斛、玄参组成，具有补益肝肾、活血化瘀等功效。有研究显示，脉络宁对缺氧诱导的人脐静脉内皮细胞损伤有保护作用[6]。脉络宁注射液可降低高糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡[7]。但脉络宁注射液对Hcy诱导的血管内皮细胞损伤是否具有保护作用尚未明确。因此，本研究以人脐静脉内皮细胞ECV304为研究对象，旨在探讨脉络宁注射液对Hcy诱导的ECV304细胞增殖、凋亡、氧化应激及蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂和仪器 RPMI 1640培养基购自美国Gibco公司；脉络宁注射液购自金陵药业股份有限公司南京金陵制药厂；四甲基偶氮唑盐(MTT)溶液、二甲基亚砜(DMSO)均购自美国Sigma公司；细胞凋亡试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒及微量丙二醛(MDA)试剂盒均购自江苏凯基生物科技发展有限公司；2′，7′-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针购自江苏碧云天公司；Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、淋巴瘤B细胞-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)抗体购自美国Abcam公司；流式细胞仪购自美国BD公司。

    1.2 细胞培养 人脐静脉内皮细胞ECV304购自美国ATCC。细胞常规复苏后 ......