宋璐霞，张 杰，马 丹，樊懿萱，刘启予，赵 麟，徐 浩，3

    动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是发生于动脉血管壁(主要累及大中肌性动脉)的慢性疾病，是冠心病、高血压等多种心脑血管疾病的危险因素。巨噬细胞作为动脉粥样硬化斑块中的主要炎性细胞，在促进早期斑块形成、稀释纤维帽和核心坏死成分、增强免疫应答反应等方面具有重要作用[1]。巨噬细胞在不同因素刺激下发生表型的分化即巨噬细胞极化，可分为M1、M2 型巨噬细胞。M1 型巨噬细胞能够分泌促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、趋化因子配体-5(CCL-5)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)等[2]参与炎症反应过程；而M2型巨噬细胞则主要参与组织重塑及炎症消退过程[3]。

    丹参为唇形科植物丹参的干燥根和根茎，具有活血化瘀、通经止痛、清心除烦、凉血消痈的功效。丹参酮ⅡA为丹参的脂溶性有效活性成分，已有大量临床及基础研究显示其具有抗炎、抗氧化应激等作用，在保护血管内皮细胞功能、抗动脉粥样硬化中发挥重要作用[4-6]。然而，丹参酮ⅡA从影响巨噬细胞极化角度探索抗炎作用的实验证据尚待完善。故本实验以脂多糖(LPS)刺激的RAW264.7巨噬细胞为体外炎症细胞模型为研究对象，从巨噬细胞极化角度出发探讨丹参酮ⅡA抗炎的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 细胞及药品 小鼠单核巨噬细胞RAW264.7购自武汉普诺赛生命科技有限公司；丹参酮ⅡA购自美国APExBIO公司，N184611337769；LPS购自Solarbio公司，L8880。

    1.2 试剂与仪器 DMEM培养基(Gibico公司，C11885500BT)；CCK-8 试剂盒(赛百科公司，F25)；LipofectamineTM3000 Transfection Reagent、TurboFectTMTransfection Reagent、SuperScriptⅢ逆转录试剂盒、Sybr qpcr mix均购自THERMO公司；T4 DNA Ligase(Transgen公司，FL101-01)；封闭专用脱脂奶粉(北京普利莱公司，P622，2021MOAP1622)；10x电转液(北京Solarbio公司，D1060，批号20210220)；5xTris-甘氨酸电泳缓冲液(北京Solarbio公司，D1060)；二哇啉甲酸(BCA)蛋白质定量试剂盒(北京普利莱公司，P1511)；4×十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离胶缓冲液(北京Solarbio公司 ......