牡荆素调控NF-κB信号通路在MCAO大鼠中的抗炎、神经保护作用及机制研究
脑组织,低剂量,缺血性,1材料与方法,2结果,3讨论
侯芳芳,李向斌脑卒中是我国人口死亡的第二大原因,同时也是导致成人残疾的首要原因,其中以缺血性脑卒中最为常见。缺血性脑卒中以脑动脉硬化导致的动脉狭窄闭塞、脑组织血流量减少、脑供血不足而引起的脑组织坏死、神经功能损伤为主要表现。其临床治疗以重建微血管循环,尽早恢复血流供应为主[1-3]。然而缺血脑组织血液供应的突然恢复,往往会导致缺血再灌注损伤,使脑组织及其功能进一步受到损害[4]。研究显示,核转录因子-κB(NF-κB)信号通路及其介导的炎症反应与缺血性脑卒中的发生发展关系密切,靶向炎性因子及NF-κB通路已成为近年缺血性脑血管疾病治疗的重要靶点[5]。牡荆素为山楂叶中提取的黄酮类单体成分,具有抗炎、抗氧化、镇痛、神经保护等多种药理学作用,对缺血缺氧性脑损伤具有重要的保护作用[6]。研究表明,牡荆素能够改善缺血缺氧所致的脑组织及神经功能损伤[7-8]。然而其神经保护作用是否与NF-κB信号通路相关尚不明确。本研究通过线栓法建立大鼠局灶性脑缺血(MCAO)模型,观察牡荆素对MCAO大鼠神经损伤的保护作用,并探讨其调控NF-κB信号通路发挥抗炎及神经保护作用的机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物 Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠120只,无特定病原体(SPF)级,体质量(200±20)g,实验前1周于动物房适应性饲养。
1.2 实验药物与试剂 牡荆素(每瓶10 mg)购自合肥七星医药科技有限公司,临用前用生理盐水稀释至所需浓度;尼莫地平(每片20 mg)购自山东新华制药股份有限公司;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)试剂购自北京索莱宝科技有限公司;苏木精-伊红(HE)染色试剂盒购自上海生工生物工程有限公司;白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)酶联免疫吸附实验(ELISA)试剂盒购自南京森贝伽生物科技有限公司;核转录因子κB p65(NF-κB p65)抗体、NF-κB抑制蛋白(IκB)α、NF-κB抑制蛋白激酶(IκK)β、β-actin购自Santa Crutz公司;Trizol 总RNA提取试剂盒、逆转录试剂盒购自碧云天生物技术有限公司。
1.3 实验方法
1.3.1 分组与给药 将SD大鼠随机分为6组:正常组、假手术组、模型组、阳性对照组、牡荆素低剂量组、牡荆素高剂量组 ......
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