王洪海，周颖璨，周德生，刘利娟

    近年来，我国脑卒中患病率呈整体上升趋势且趋于年轻化，是目前我国成人致死、致残的首位病因[1]，其中以缺血性脑卒中(cerebral ischemic stroke，CIS)发病为主，治疗该病的关键在于尽早开通阻塞血管，挽救缺血半暗带，但脑缺血再灌注后可加重脑组织损伤，且细胞凋亡在该病的病理生理过程中具有重要作用[2]。活血荣络方为周德生导师临床经验方，前期实验表明，活血荣络方可通过抑制Janus激酶2/信号转导与转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路，调节白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达，对脑缺血再灌注后损伤具有保护作用[3]，促进脑梗死血管再生[4]。本研究采用线栓法制备局灶性大脑中动脉脑缺血(middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型，采用活血荣络方干预，通过免疫组化检查脑缺血再灌注后患侧脑组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平及神经功能缺损评分，旨在探讨活血荣络方对脑缺血再灌注损伤中细胞凋亡的作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 无特定病原体(SPF)级健康雄性SD大鼠72只，体质量(250±20)g，购自湖南斯莱克景达实验有限公司，许可证号：SYXK(湘)2013-0005，饲养于湖南中医药大学SPF级动物实验中心。本研究中动物实验室护理及使用完全遵照1986年英国颁布《动物科学实验法》。

    1.2 主要试剂及药物

    1.2.1 主要试剂 通用型二步法检测试剂盒(购自北京中杉金桥生物公司；编号K152318A)，二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒(购自武汉博士德生物公司；编号AR1022)，兔抗鼠Bax、Bcl-2多克隆抗体(购自武汉博士德生物公司，编号分别为BA0315-1、BA0412) ......