骆元平，吴钟伟，曾垂旭

    心血管疾病带来沉重的医疗和社会负担，美国约500万例病人受到影响，其中缺血性心脏病是心力衰竭的主要原因，也是导致临床心血管疾病发病率和死亡率较高的主要原因，是世界范围内的主要公共卫生问题[1]。有研究显示，缺血性心脏病引起的心肌损伤可能是由于心肌缺血或缺氧后血供恢复所致[2]，然而，潜在的机制尚未明确。因此，从缺氧诱导的心肌细胞损伤模型中寻找有效的治疗靶点和潜在机制，可为临床预防和治疗心肌缺血疾病提供科学思路。

    脯氨酸羟化酶结构域蛋白(PHDs)是一种双加氧酶，通过羟基化低氧诱导因子(HIF-1)中保守的Prolyl残基，与细胞对氧可用性的反应密切相关[3]。PHD家族由3个成员组成，PHD1、PHD2和PHD3，每个亚型均显示出组织和细胞系的特异性功能[4]。在3种PHDs中，PHD2在PHD活性中作用最强，在结肠癌、肝癌和黑色素瘤中表达较低，对癌细胞存活和肿瘤细胞增殖具有抑制作用[5-7]。然而，关于评估PHD在缺氧诱导的心肌细胞损伤中作用的研究较少。因此，探讨PHD2在缺氧诱导的心肌细胞损伤模型中的作用及潜在机制，可为缺氧造成的心肌缺血性疾病提供新方向。本研究检测心肌缺血病人血清PHD2表达，进一步探讨PHD2在缺氧诱导的心肌细胞损伤中的作用和潜在分子机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 临床样本 收集我院健康体检者和心内科心肌缺血病人血清样本各35份。所有研究对象均签署知情同意书，所有血清样本保存于-80 ℃条件下待用。

    1.1.2 实验细胞 小鼠心肌细胞HL-1购自中国科学院上海细胞生物学研究所。

    1.1.3 实验试剂 PHD2酶联免疫吸附(ELISA)测定试剂盒购自美国LSBio公司；肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒购自北京欣博生公司；DMEM培养液、胎牛血清(FBS)、青霉素和链霉素均购自美国Gibco公司；谷氨酰胺购自美国Sigma-Aldrich公司；过表达PHD2的质粒和载体pcDNA3.1由Invitrogen公司提供 ......