刘 蕾，赵雪东，王智彬

    急性心肌梗死是临床常见的缺血性心血管疾病类型，近年来，缺血性心血管疾病发生率及死亡率逐年增加，严重威胁人类生命。临床采用冠状动脉介入等方式治疗急性心肌梗死，但心肌再灌注导致心肌缺血再灌注损伤发生[1-2]。目前关于心肌缺血再灌注损伤的分子机制尚未明确。有研究显示，九龙藤总黄酮等中医药具有抗氧化、抗炎等作用[3]，但关于中医药对心肌细胞氧化损伤的作用机制尚未明确。五味子是我国传统中药，具有补肾宁心、益气生津的功效，其中北五味子多糖(schisandra chinensis polysaccharide，SCP)具有抗氧化、增强免疫力、抗肿瘤等作用，有研究表明，SCP可抑制促炎因子释放，抑制炎症反应[4]。但SCP对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation，H/R)心肌细胞氧化损伤的作用机制尚未明确。巨噬细胞中微小RNA(microRNA，miR)-212-3p表达下调，miR-212-3p通过靶向调控高迁移率族蛋白B1(HMGB1)抑制脂多糖诱导的炎症反应[5]。生物信息学分析显示，10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)可能是miR-212-3p的靶基因，抑制PTEN表达可抑制H/R诱导的星形胶质细胞凋亡[6]。本研究通过分析SCP对H/R诱导的心肌细胞凋亡及氧化应激损伤的影响，分析对miR-212-3p/PTEN分子轴的调控作用，为SCP治疗急性心肌梗死等心血管疾病提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料与试剂 SCP购自秦皇岛旭光生物科技有限公司，采用二氧化碳瘤体萃取SCP，分离水溶性成分与脂溶性成分，应用超声波搅拌，超声波预处理40 min后浸润，采用酶法与三氯乙酸结合脱蛋白得到SCP，提取有效率为77.6%，纯度为50%[7]。大鼠心肌细胞H9c2由深圳市百恩维生物科技有限公司提供；miR-212-3p mimics、anti-miR-212-3p、miR-NC、anti-miR-NC由广州锐博生物科技有限公司提供；兔抗鼠PTEN抗体由北京百奥莱博科技有限公司提供；兔抗鼠Bax、Cleaved Caspase-3抗体均由美国Santa Cruz公司提供；山羊抗兔二抗由美国Abcam公司提供；凋亡试剂盒由美国Sigma公司提供；Trizol试剂、反转录试剂盒及实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)试剂盒均由北京天根生化科技有限公司提供；乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供 ......