刘思远，于明帅，张 科

    常见的心血管疾病有冠心病、高血压、动脉粥样硬化和心脏病等，具有高发病率和高死亡率的特点，心肌缺血再灌注引起的心肌损伤是心血管疾病的主要诱因，因此，如何有效减缓心肌细胞缺血再灌注引起的细胞损伤是当前医学研究的热点[1-2]。心肌细胞凋亡、氧化应激和炎症反应作为心肌细胞缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌损伤机制[3]。普鲁卡因(procaine，PCA)是一种局部麻醉的氨基酯类药物，具有毒性小、麻醉效果好和价格便宜等优点[4]。有研究显示，PCA可以通过上调热休克蛋白27(HSP27)促进过氧化氢诱导的心肌细胞增殖，抑制心肌细胞凋亡，减缓心肌细胞的氧化损伤[5]。有研究结果显示，Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号可能参与心肌细胞H/R诱导的细胞凋亡、氧化应激和炎症反应[6]。蔡智慧等[7]研究结果显示，栀子苷可以通过抑制TLR4/NF-κB通路减缓H/R诱导的大鼠心肌细胞炎性损伤。因此，本研究通过H/R诱导心肌细胞建立模型，探讨PCA是否可以通过TLR4/NF-κB通路影响H/R诱导的心肌细胞活力、凋亡、氧化应激和炎症反应。

    1 材料与方法

    1.1 细胞和主要试剂 大鼠H9c2心肌细胞，购自中国科学院上海细胞库；胎牛血清、高糖DEME培养基，购自美国Gibco公司；青霉素、链霉素、四甲基偶氮唑盐(MTT)试剂盒，购自北京索莱宝科技有限公司；盐酸普鲁卡因注射液，购自江苏悦兴药业有限公司，规格：50 mg(20 mL)，批准文号：国药准字H32024570；NF-κB通路抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)，购自美国Sigma-Aldrich公司；Bcl-2抗体、Bax抗体、TLR4抗体、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)p65抗体、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)抗体、NF-κB p65抗体、NF-κB抑制蛋白(IκBα)抗体、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)抗体 ......