艾芬地尔对脑缺血再灌注大鼠脑细胞NR2B亚基表达的影响及脑保护作用
神经功能,1材料与方法,2结果,3讨论
李振宇,王天栋,李作鹏,张 金急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)是人类致残、致死的主要病因之一。随着医疗技术的进步,静脉溶栓与机械取栓已广泛应用于临床,脑血流再通率显著提高[1]。研究显示,静脉溶栓桥接机械取栓脑血管再通率可达88%[2]。然而,血流再通后所致的缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)可加重神经细胞坏死[3]。所以,再灌注后的神经保护非常关键。
NR2B为N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDAR)的亚基之一,此亚基通常表达于海马、丘脑与前脑皮层等区域的神经细胞突触外细胞膜。正常情况下,此亚基会结合谷氨酸(glutamate,Glu),使NMDAR活化,从而使神经细胞得以维持正常机能。若出现脑缺血与再灌注,Glu过量积聚使NMDAR过表达,从而引起一系列致细胞坏死或凋亡过程即兴奋性氨基酸(excitatory amino acid,EAA)毒性作用[4]。艾芬地尔(Ifenprodil)是一类高选择性NMDAR阻滞剂,对过度激活的NMDAR具有抑制作用,使其生成的兴奋性毒性下降,释放神经保护效能[5]。本研究探讨艾芬地尔对脑缺血再灌注后各阶段NR2B亚基表达状况的影响与脑保护作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物 清洁级雄性SD大鼠67只,9~11周龄,体质量250~310 g,由山西医科大学动物实验中心提供,实验动物生产许可证:SCXK(晋)2019-0004。于屏蔽环境实验室进行实验,湿度40%~55%,温度22~26 ℃,明暗光照12 h/12 h。
1.2 实验试剂及材料 ①艾芬地尔(上海陶素公司生产),将25 mg 艾芬地尔溶于0.1 L生理盐水中制成艾芬地尔溶液;②兔抗大鼠NMDAR-NR2B多抗由北京博奥森公司生产;③SABC-POD[兔免疫球蛋白G(IgG)]试剂盒(即用型)、羊抗兔IgG(由生物素标记)由武汉博士德公司生产;④2,3,5氯化三苯基四氮唑(TTC)(北京索莱宝公司生产) ......
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