于心洋，刘云平，张贺齐，尚淑玲

    缺血性脑卒中是由于血管阻塞，血流量减少，引起脑供血不足、脑组织损伤的一类疾病，以脑组织坏死引起的神经功能损伤为主要表现。缺血性脑卒中患病率高，具有较高的致死率、致残率，严重危害人类生命与健康[1]。缺血性脑卒中早期，若及时恢复血供，促进缺血区新生血管形成，不仅有利于变性神经元修复，并且可为神经元功能的重塑提供良好的微环境，促进病人脑组织损伤及对神经功能恢复[2]。脑组织缺血后，激活缺氧诱导因子(HIF)-血管内皮生长因子(VEGF)-Notch信号通路，可介导微血管代偿性再生，是调节缺血性脑卒中病人微血管新生的重要作用靶点[3]。水蛭素为水蛭的主要有效成分，具有抗凝、抗血栓、抑制炎症反应、抗氧化等多种药理作用，治疗脑血管疾病疗效显著[4]。相关研究表明，水蛭素能减轻脑组织微血管内皮细胞损伤，改善血肿周围神经细胞损伤，并抑制细胞凋亡[5]。本研究通过线栓法复制大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO)，观察水蛭素对MCAO大鼠脑组织微血管新生的影响及神经损伤的保护作用，并探讨其调节HIF-VEGF-Notch信号通路的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 SD大鼠120只，雄性，无特定病原体(SPF)级，体质量180～220 g，实验前在25 ℃、50%相对湿度的环境中适应性饲养1周，自由进食、进水，定时更换垫料。

    1.2 实验试剂 水蛭素(酵母重组)购自Calbiochem公司；尼莫地平购自山东新华制药股份有限公司；2，3，5-氯化三苯基四氮唑(TTC)试剂购自北京索莱宝科技有限公司；兔抗大鼠CD31+抗体试剂盒，羊抗大鼠IgG-生物素，二氮基联苯胺(DAB)试剂盒购自武汉博士德公司；HIF-1α、VEGF、Notch1、磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde phosphate dehydrogenase，GAPDH)鼠单克隆抗体购自Santa Crutz公司 ......