曾羽霄，庄少伟

    多种心肌疾病中均存在心肌细胞凋亡的现象。心肌细胞凋亡、炎症可造成急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)进一步加重并引发心肌功能障碍、心力衰竭等，导致病人死亡风险升高[1]。近年来的研究发现，长链非编码RNA(long noncoding RNA，lncRNAs)和短非编码RNA(miRNAs)在生物过程中发挥重要的作用。lncRNA是一类长度大于200多个核苷酸的转录RNA分子，参与调控细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学行为。NEAT1是一种长度约为3 700 nt的lncRNA，定位于11q13.1，与mRNA前体剪接区域 SC-35有密切联系，研究显示NEAT1参与调节细胞增殖、凋亡和迁移等多种癌症相关的细胞活动[2]。最近研究显示，NEAT1可通过产生肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)促进炎症反应[3]。miRNA为18～25个核苷酸之间的内源性短链非编码RNA分子，主要结合 mRNA 的非翻译区，下调或者抑制mRNA的转录与翻译，进而调控下游靶基因的表达，参与各种疾病的病理过程[4]。miR-193a-3p来源于miR-193家族，其抗肿瘤活性已在肺癌和肾细胞癌等各种癌症研究中广泛报道[5]。竞争性内源RNA(ceRNA)假说的提出让人们对lncRNAs和miRNAs之间的作用机制有了新的认识。当前研究表明，lncRNA可作为ceRNA并竞争性结合到miRNA，从而调节mRNA的转录水平并调节基因表达[6]。已有研究显示，NEAT1作为ceRNA并结合miR-193a-3p以加速肺腺癌恶化[7]。但是NEAT1和miR-193a-3p在心肌细胞损伤是否存在某种调控关系及其作用机制尚不明确。本研究用脂多糖(LPS)处理心肌H9c2细胞建立心肌细胞损伤模型，探讨NEAT1/miR-193a-3p在心肌细胞损伤中的作用，并且分析其影响炎性损伤的潜在机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞株 胚胎大鼠心肌H9c2细胞，购自上海匹拓生物科技有限公司。

    1.1.2 主要试剂 脂多糖购自上海广锐生物科技有限公司；胎牛血清、DMEM培养液和胰蛋白酶购自美国Gibico公司；Trizol试剂和Lipofectamine 2000购自美国Invitrogen公司；细胞计数试剂盒-8(CCK-8)试剂盒、增强型化学发光(ECL)试剂盒和RIPA 蛋白裂解液购自中国上海碧云天生物技术有限公司；二喹啉甲酸(BCA)蛋白分析试剂盒购自中国南京碧云天生物技术有限公司；双萤光素酶报告基因检测试剂盒购自Promega；膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(annexin V-FITC)和碘化丙啶(propidium iodide ......