李 悦，王肖龙，姚成增

    慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)是各种心血管疾病发展的终末阶段，且预后较差[1]。慢性心肌肥大及其相关的心肌重构是CHF发生发展的主要病理基础[2]。血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ，AngⅡ)作为肾素-血管紧张素-醛固酮系统的主要组成部分，是导致心肌肥大及心肌重构的重要致病因素，而血管紧张素转换酶抑制剂及AngⅡ受体拮抗剂可抑制心肌肥大的发展进程[3]。因此，抑制AngⅡ相关的心肌肥大对改善CHF预后具有重要意义。

    中医药防治CHF相关证候历史候久。多项临床研究证实，中医药可改善CHF病人的临床症状，提高CHF病人的生活质量[4]。坎离颗粒是蒋梅先教授在继承全国名老中医张伯臾的学术经验基础上，创制的治疗CHF经验方，经本学科长期应用，疗效显著。临床研究已证实，坎离颗粒对CHF病人的疗效显著，能明显改善CHF病人的肾素-血管紧张素-醛固酮系统指标、内皮功能及心率变异性等，提高心力衰竭病人的活动耐量和生活质量[5-7]。基础研究也已证实，坎离颗粒具有改善心肌一氧化氮(NO)/内皮素(ET)值，抑制心肌细胞凋亡，降低其心肌胶原体积分数、心脏指数、左室质量指数、左心室舒张末期内径，升高Ⅰ/Ⅲ型胶原比值等药理效应[8-9]。本研究运用AngⅡ诱导心肌肥大，探索坎离颗粒抗CHF的作用机制，以期为坎离颗粒在心血管疾病方面的应用提供更有力的证据，为心血管疾病的治疗提供新方向。

    1 材料与方法

    1.1 材料 实验药物坎离颗粒(生黄芪、熟附子、白术等9味中药组成)由上海中医药大学附属曙光临床医学院制剂室制作而成；H9c2心肌细胞购自上海中国科学院细胞库；AngⅡ(货号：A9525)购自美国Sigma公司；改良伊格尔培养基DMEM(货号：C11995500CP)、胎牛血清(货号：10099141)、胰蛋白酶(货号：25200072)和青霉素/链霉素双抗(货号：15140122)购自美国Gibco公司；BCA蛋白定量试剂盒(货号：NCI3225CH)购自美国Thermo公司；RIPA裂解液(货号：P0013C)购自中国碧云天公司；CellTiter-Glo?发光法细胞活力检测试剂盒(货号：G7571)购自美国Promega公司；TRIzol试剂(货号：15596-026)购自美国Invitrogen 公司；RNA抽提试剂盒Direct-zolTMRNA MiniPrep(货号：A-R2051)购自美国Zymo Research公司；逆转录试剂盒(货号：RR047A)购自日本Takara公司；实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)试剂盒(货号：AM1005)购自美国Thermo公司；BCA蛋白浓度测定试剂盒(货号：NCI3225CH)购自美国Thermo公司；兔多克隆抗体心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide ......