秦 琦,王有雪,左 芳,王东海

    心肌梗死(MI)是在冠状动脉粥样硬化的基础上,因斑块破裂导致急性血供中断,造成心肌缺血坏死的一种疾病,是致死率最高的疾病之一,严重威胁人类健康。近年来,该疾病的发病率急剧上升,而且呈现年轻化趋势,造成病人的生活质量严重下降[1]。近年来在药物治疗缺血性心肌损伤方面有了最新进展,神经调节蛋白1(NRG1)/erb-b2 受体酪氨酸激酶(ErbB)2 通路成了国内外最新研究热点,有研究表明,NRG1-ErbB2 通路可以减少心肌细胞的缺血损伤、凋亡,抑制心肌细胞增殖及平滑肌过度增生[2]。Polizzotti 等[3]研究应用局部冷冻的方法损伤新生小鼠的心肌细胞,应用NRG1 治疗后心肌细胞功能明显保留,而且依然保持了心肌细胞的再生能力。有研究推测NRG1 疗法有可能是通过刺激新生血管来保护心肌免于损伤[4]。而且有研究表明缺氧可以增高内质网压力,并诱导心肌凋亡,而NRG1 疗法可以减少其导致的心肌细胞损伤从而保护心脏[5]。然而大量补充NRG1 存在副作用,如心功能损伤及致癌风险等,因此,合理的剂量及应用疗程成了目前研究的热点。中医学在冠心病治疗上具有安全有效、副作用小等独特的优势。前期临床研究表明,两和辅心饮具有理气和血、宁心安神之功效,能有效改善冠心病病人疼痛及活动后气短等临床症状。另外,还发现部分病人服用两和辅心饮后复查心脏彩超梗死面积较前缩小,但具体作用机制尚不清楚。因此,进一步研究其作用机制是本课题组下一步拟进行的工作。结合前期预实验结果,本研究旨在寻找两和辅心饮与心肌代谢通路NRG1-ErbB2 的关系,并探讨其对心肌细胞损伤的修复作用,以期为冠心病的治疗以及该方剂的进一步临床应用提供科研数据支撑。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物分组与取材

    1.1.1 实验动物与分组 3～6 月龄无特定病原体(SPF)级Wistar 雄性大鼠80 只,体质量(200±20)g,实验动物均由辽宁中医药大学实验动物中心提供,动物许可证号:SCXK(辽)2018-0001。适应性喂养1 周。按随机数字表法随机分为5 组:假手术组(Sham 组)、模型组(MIRI 组)、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组16 只。

    1.1.2 动物造模方法 参照杨建业等改进的造模方法,制造液氮冷冻大鼠心肌梗死模型[6]。取Wistar 大鼠,按照250 mg/kg 剂量腹腔注射10%水合氯醛,待其麻醉成功后气管切开、插管,应用动物呼吸机正压辅助通气。胸部去毛,消毒,沿左锁骨中线纵行切开皮肤2～3 cm,分别剥离深浅筋膜,在第4 肋间或第5 肋间钝性分离肌层,撕开心包,用棉签推开胸腺,暴露心脏,在主动脉根部约1/3 处找到左冠状动脉,用圆柱形钢钉头部(头直径0.2 cm)迅速置于该区域并冷冻约10 s ......