伊加提·司马义,帕合热丁·努尔麦麦提,阿布都乃比·麦麦提艾力

    冠心病是冠状动脉功能性或器质性病变导致的一类心脏病,病人冠状动脉供血和心肌需求平衡紊乱,心肌合并不同程度缺血、缺氧表现[1]。有研究指出,血脂代谢异常和血管内皮功能损伤是影响冠心病发生的主要因素,同时也是影响冠心病病人预后及不良心血管事件的主要因素[2-3]。因此,改善血脂水平、缓解血管内皮损伤是目前治疗冠心病的关键所在。线粒体ATP敏感性钾离子通道(mito-KATP)开放剂是一种用于缓解心肌缺血再灌注损伤的心肌保护药物,可通过作用于心肌及血管平滑肌上的mito-KATP,调节钾离子内流情况,促进线粒体氧化磷酸化及ATP 的产生[4]。二氮嗪作为mito-KATP 开放剂,已经被证明具有对抗心肌损伤的作用,但其在冠心病中对血管内皮损伤的作用及机制尚不明确[5]。本研究通过构建冠心病模型大鼠,于实验动物体内探究二氮嗪对冠心病大鼠血管内皮损伤的作用,并进一步明确其机制,为临床治疗提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物 无特定病原体(SPF)级健康SD 大鼠30 只,雌雄各半,由广东省医学实验动物中心提供。体质量(220±20)g,分笼饲养,每笼1 只,室温20～22 ℃,相对湿度60%～65%,期间自由饮水,定时摄食,日光照12 h。所有动物实验均经伦理委员会批准。

    1.1.2 试剂及药品 垂体后叶注射液[安徽宏业药业有限公司生产,国药准字H34022977;规格:1 mL(6 U),10支];二氮嗪(上海博顿生物化工有限公司生产,批号:100203-201301,纯度:99.95%);大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6 酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(美国RD 公司生产);实时荧光定量逆转录试剂盒、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)试剂盒(日本TaKaRa 公司生产);兔抗鼠3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)单克隆抗体、兔抗鼠成纤维细胞生长因子2(FGF-2)单克隆抗体、兔抗鼠血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体(美国Abcam 公司生产);二喹啉甲酸(BCA)蛋白定量试剂盒(美国Invitrogen 公司生产);血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)试剂盒(南京建成生物工程研究所生产);蛋白上样缓冲液(上海碧云天生物技术有限公司生产)。

    1.1.3 主要仪器 UV-9100 紫外分光光度计(美国Mettler Toledo 公司生产);Mini Protean 3 cell 电泳仪、Universal Hood Ⅱ凝胶成像系统(美国Bio-Rad 公司生产);Pureloab Classic UVF 超纯水仪(法国ELGA Labwater 生产);HITACH17080 全自动生化分析仪(上海曼普生物科技有限公司生产) ......