邓楚珺,孟胜喜,陈慧泽,王 兵,郭起浩,付剑亮

    阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种严重危害人类健康的神经系统退行性疾病,给病人家庭及社会均造成了较大的经济负担和照顾负担[1]。作为膜转运蛋白的水通道蛋白4(AQP4)通过β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)清除[2]、突触可塑性[3]、谷氨酸稳态[4]、离子稳态[5]、神经炎症[6]等方面对AD 发生、发展起着重要的作用。本课题组前期的研究已经发现,梓醇-川芎嗪方(CT 方)具有提高AD 模型小鼠认知功能的作用[7]。为了进一步验证梓醇-川芎嗪方对AD 的作用,并探讨其对AQP4 表达的影响,故开展本试验。

    1 材料与方法

    1.1 动物与分组 非特定病原体(SPF)级、雄性、β-淀粉样前体蛋白 swe 基因/早老蛋白 1dE9 基因(APPswe/PS1dE9)双转基因小鼠50 只,6 月龄,按照随机数字表法分为模型组、盐酸多奈哌齐片(安理申)组、梓醇-川芎嗪方低剂量组(CT-L 组)、梓醇-川芎嗪方中剂量组(CT-M 组)、梓醇-川芎嗪方高剂量组(CT-H组),每组均为10 只。另选10 只同月龄C57BL/6J 小鼠作为对照组。以上动物均购自北京华阜康生物科技股份有限公司,许可证号:SCXK(京)2018-0006。以上动物饲养环境均为温度(23±2)℃、湿度(55±5)%、明暗循环为12 h,自由进食和饮水。

    1.2 药物、试剂及仪器 梓醇-川芎嗪方是由4.274 mg 的梓醇和1.554 mg 的川芎嗪组成。梓醇,CAS 号:2415-24-9,分子式:C15H22O10,分子量:362.33,纯度≥98.0%,Batch No.DSTDZ000502。川芎嗪,CAS 号:1124-11-4,分子式:C8H12N2,分子量:136.19,纯度≥98.0%,Batch No.DST200602-032,以上均由上海沪峥生物科技有限公司提供。盐酸多奈哌齐片,规格:每片5 mg,商品名:安理申,国药准字:H20200978,lot:1705080,由卫材(中国)药业有限公司提供。

    Morris 水迷宫(Morris water maze,MWM),型号JLBehv-MWMG-1,购自上海吉量软件科技有限公司。AQP4 多克隆抗体(lot:PB0500)及羊抗兔抗体(lot:KGAA35)购自美国Boster Biological Technology 公司。丙二醛(MDA,lot:A003-1-2)、超氧化物歧化酶(SOD,lot:A001-3-2)、过氧化氢酶(CAT,lot:A007-1-1)、总抗氧化能力(T-AOC,lot:A015-2-13),以上试剂盒均购自南京建成生物工程研究所 ......