张 颖，黄世敬，陈 朝，陈宇霞

    抑郁症为情感障碍性疾病，主要表现为健忘、失眠、情绪低落及焦躁不安等，中、重度抑郁导致病人生活和社会工作能力明显下降，尤其是重度抑郁的自杀倾向和行为给家庭带来严重的经济和思想负担，给社会造成不良影响，其发病高，发病机制仍不明晰，且治疗周期长、易复发、病人的依从性差，故抗抑郁症的防治目前成为医学界重要的关注点之一[1]。本研究拟采用慢性不可预见性温和刺激(CUMS)方法复制抑郁症模型，采用基因芯片技术对小鼠海马组织进行基因检测，寻找异常差异表达基因，探讨海马神经组织的功能变化及病理损伤，通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)确认基因芯片结果，并通过体外细胞实验验证刺猬相互作用蛋白(HHIP)对海马神经元的干预作用，为进一步揭示抑郁、焦虑症的发病机制及提高临床诊疗水平提供新的思路和依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与分组 C57BL/6N小鼠50只，雄性，体质量18～21 g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号：SCXK(京)2012-0001。无特定病原体(SPF)级、室温25 ℃、湿度46%饲养。自由活动，标准饮食、饮水。小鼠适应性饲养3 d，根据体质量采用分层法随机分为两组，对照组20只，模型组30只。对照组分为两笼，每笼10只。

    1.2 试剂与仪器

    1.2.1 实验试剂 Agilent Mouse Gene Expression(Agilent，028005)，Bcl-2抗体(Santa cruz，Sc-492)，Bax抗体(Abcam，ab135240)，HHIP抗体(Abcam，ab39208)，Beta actin(中杉，TA-09)，胎牛血清(Gibco，26050070)，胰蛋白酶(Gibco，LP0042)，质粒DNA大鼠抽提试剂盒(Tiangen，DP117)，DMEM(Gibco，11965118)，腺相关病毒纯化试剂盒(Biomiga，V1469-01)，LipofiterTM转染试剂(Hanbio Biotechnology，HB-TRCF-1000)，enonase(Signa，E1014)，Trizol RNA抽提试剂(Invitrogen，15596026),引物(GAPDH-F：TCATTGACCTCAACTACATGG，GAPDH-R：CGCTCCTGGAAGATGGTG，HHIP-F：TCAAGGAGCCTTACTTGGACA ......