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编号:208421
红参调控DARS-AS1/miR-125a-5p通路对人血管平滑肌细胞生物学过程的影响
http://www.100md.com 2022年2月16日 中西医结合心脑血管病杂志 2022年第23期
靶向,1材料与方法,2结果,3讨论
     黄达民,张金春,宋 蕾,岳冬梅,刘洪强,卢英民

    动脉粥样硬化是促使心脑血管疾病发生的重要病理基础之一,动脉粥样硬化的发生率逐年升高,研究显示,血管平滑肌细胞增殖、迁移及炎症反应与动脉粥样硬化密切相关[1-2]。因而,积极探寻调控血管平滑肌细胞增殖、迁移及侵袭的有效药物对心脑血管疾病的治疗具有重要意义。同型半胱氨酸(Hcy)可诱导血管平滑肌细胞增殖、迁移及侵袭从而促进动脉粥样硬化的发生,因此,常采用Hcy诱导血管平滑肌细胞建立模型[3]。红参(red ginseng,RG)具有抗氧化作用,从而可减缓多种疾病的发展进程[4]。但红参对血管平滑肌细胞损伤的作用机制尚未明确。长链非编码RNA DARS-AS1(LncRNA DARS-AS1)在甲状腺癌等肿瘤中表达上调,并可促进肿瘤的发生及发展[5]。但DARS-AS1对血管平滑肌细胞损伤的作用机制尚未阐明。生物信息学分析显示,微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)可能是DARS-AS1的靶基因,氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人血管平滑肌细胞中miR-125a-5p的表达下调,上调其表达可通过靶向调控(NLRP3)的表达从而抑制细胞增殖[6]。但红参是否可通过调控DARS-AS1/miR-125a-5p通路而影响血管平滑肌细胞生物学行为尚未可知。因此,本研究采用Hcy处理人血管平滑肌细胞,探讨红参对细胞增殖、迁移及侵袭的影响,探究其对DARS-AS1/miR-125a-5p通路的调控作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验试剂 红参购自上海齐一生物公司;人血管平滑肌细胞购自美国ATCC公司;Hcy与四唑盐(MTT)购自美国Sigma公司;反转录与荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测试剂盒购自美国Thermo Fisher公司;DARS-AS1小分子干扰RNA(DARS-AS1 siRNA,si-DARS-AS1)、siRNA阴性序列(si-NC)、miR-125a-5p mimics及mimic 阴性序列(miR-NC)购自广州锐博生物公司;pcDNA3.1购自上海柯雷生物公司;兔抗人CyclinD1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、p21抗体购自美国CST公司;二抗购自美国Abcam公司 ......

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