陈 静，李 芹

    溶栓治疗或经皮冠状动脉介入治疗及时恢复冠状动脉血流是减轻急性心肌缺血损伤，降低死亡率的有效策略，然而再灌注可诱发心肌缺血/再灌注(I/R)损伤。氧化应激、细胞凋亡、炎症反应是I/R发生的关键因素[1]。因此，针对上述因素制定有效的干预措施或策略对防止心肌I/R损伤具有重要的临床意义。相关研究显示，药物预处理是一种有效的心肌保护手段，可增强机体对I/R耐受能力，缩小心肌损伤面积，改善预后[2]。木棉花是木棉科木棉属植物木棉Bombax malabaricum DC.的干燥花，富含总黄酮、多糖等化学成分，具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、降血脂、降血糖、保肝等药理活性，是中药方剂、凉茶的重要原料[3]。相关研究显示，木棉花提取物可清除内皮细胞内活性氧，抑制氧化应激，对过氧化氢诱导的内皮细胞损伤具有保护作用[4]。木棉花提取物通过调控微小RNA(miR)-30b-3p表达可抑制骨关节炎软骨细胞炎症反应和细胞凋亡[5]。然而木棉花提取物对心肌细胞I/R损伤的影响尚未明确。长链非编码RNA(lncRNA)是人类基因组中新发现的一类包含大于200个核苷酸的RNA转录本，其在细胞分化、增殖、凋亡和炎症等生理过程中发挥着重要作用，lncRNA表达改变与心肌I/R损伤相关[6]。有研究显示，心肌缺血病人血清2号染色体表达的肿瘤相关lncRNA(TALNEC2)表达上调，过表达lncRNA TALNEC2可激活Wnt/β-catenin通路，加重心肌细胞缺氧损伤，是心肌缺血的潜在治疗靶点[7]。但lncRNA TALNEC2在心肌I/R损伤中的作用尚未明确。本研究通过建立H9c2心肌细胞缺氧/复氧模型模拟心肌I/R损伤过程[8]，探讨木棉花提取物对心肌I/R损伤的保护作用，并通过lncRNA TALNEC2探讨其保护机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 大鼠心肌细胞H9c2购自中国典型培养物保藏中心；木棉由医院中药房提供；Lipofectamine 2000、Trizol试剂购自美国Invitrogen公司；细胞计数试剂盒(CCK)-8购自上海贝博生物公司；lncRNA TALNEC2的小干扰RNA(si-lncRNA TALNEC2)及其阴性对照(si-NC)、lncRNA TALNEC2的过表达载体(pcDNA-lncRNA TALNEC2)、空载体质粒(pcDNA)购自上海生工生物公司；丙二醛(MDA)检测试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)活性检测试剂盒购自北京索莱宝生物公司；膜联蛋白-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)细胞凋亡检测试剂盒购自上海翊圣生物科技公司；β-actin兔多克隆抗体、Bax兔单克隆抗体(ab32503)、Cleaved-Caspase-3兔单克隆抗体(ab32042)、山羊抗兔IgG二抗(ab205781)购自美国Abcam公司；PrimeScript逆转录试剂盒、SYBR Premix Ex Taq购自大连Takara公司 ......