王 礼，段春梅

    缺血性脑卒中(ischemic stroke，IS)又称为脑梗死，是一种常见的神经系统疾病，由于脑血管病变组织短暂性供血障碍，引起炎性因子及自由基积累，脑组织缺血、缺氧甚至坏死，最终导致神经细胞异常凋亡、发生梗死[1-2]。IS发病率和死亡率逐年升高，具有病后恢复时间长、预后不理想等特点，给社会和家庭造成沉重负担[3]。转化生长因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)是一种多功能调节肽，参与体内生理、生化反应及信号转导。正常情况下，大脑组织几乎不表达TGF-β1，在缺血条件下TGF-β1表达升高[4]。TGF-β1能促进下游Smad3蛋白磷酸化，激活的Smad3进入细胞核，启动相关转录因子表达，从而参与神经细胞的生长、增殖、分化和凋亡，发挥神经保护作用[5]。Caruso等[6]研究显示，应用TGF-β1对体外培养的神经细胞进行干预，可降低一氧化氮导致的神经毒性。Kotlarz等[7]研究显示，TGF-β1表达缺失可加重病人脑部组织炎性损伤。参附注射液主要成分为人参皂苷、乌头类生物碱，可增加血流灌注量，延长动物耐缺氧时间，具有抗炎、抗内毒素及保护血管内皮细胞等作用[8]。参附注射液对脑缺血性损伤的保护作用已有报道。杜婷等[9]研究显示，参附注射液可清除氧自由基，抑制脂质过氧化反应，从而减轻神经功能损伤，降低脑缺血再灌注损伤。钟升华等[10]研究显示，参附注射液可促进急性脑梗死病人神经功能恢复，降低致残率。参附注射液是否通过TGF-β1/Smad3信号通路在IS中发挥作用研究报道较少。本研究通过改良Longa线栓法构建大鼠永久性中动脉栓塞模型，探讨参附注射液是否通过TGF-β1/Smad3信号通路对IS大鼠发挥神经保护作用，以期为参附注射液治疗IS提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物 48只10～12周龄、体质量(250±20)g的无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠购自北京生物制品研究所有限责任公司，生产许可证号：SYXK(京)2020-0031。饲养环境为室温23 ℃，标准湿度60%，12 h/12 h昼夜交替，正常供应饲料和饮用水，分笼饲养。饲养1周后用于实验。

    1.1.2 实验试剂和仪器 参附注射液(雅安三九药业有限公司)；TGF-β1蛋白(美国Selleck公司)；2，3，5-三苯基氯化四氮唑(2，3，5-triphenyltetrazolium chloride，TTC)(美国Sigma公司)；TGF-β1、p-Smad3、B细胞淋巴瘤-2基因(B cell lymphoma-2 ......