张华军，刁正文，杜春富，李秋霖

    缺血性脑卒中又称为脑梗死，是临床心脑血管科的一种常见疾病，是由于血管堵塞引起脑部供血不足，进而脑组织局部出现坏死的疾病，该病发病急，病情进展迅速，致死率、致残率较高，若治疗不及时，易造成偏瘫等，甚至导致死亡[1-2]。炎症反应在脑梗死病情进展中发挥着重要作用，抑制炎症可减轻脑缺血再灌注后脑损伤[3]，是治疗缺血性脑卒中的有效手段。秦艽是一种传统中药，具有清除自由基、抗炎、抗氧化的药理作用，可提高肝脏抗氧化应激水平，抑制肝脏炎症，对脂肪肝及痛风性关节炎大鼠均有较好的治疗效果[4-5]。大鼠肉瘤(RAS)/加速纤维肉瘤(RAF)通路在体内氧化应激、炎症反应、DNA损伤等病理过程中发挥着重要的调控作用，激活RAS/RAF信号通路，可增强下游细胞外调节蛋白激酶(ERK)磷酸化水平，引发炎症，造成肝细胞损伤[6-7]，通过下调RAS表达，抑制炎症缓解脑缺血再灌注损伤[8]，由此可知RAS/RAF信号通路可能是治疗缺血性脑卒中的靶点。本研究观察秦艽对脑缺血再灌注损伤大鼠RAS/RAF通路及神经功能障碍的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物 SD大鼠购自广州中医药大学动物实验中心[SCXK(沪)2020-0002]，雄性，体质量180～220 g，清洁级，在温度23～25 ℃，湿度50%～60%的动物房中饲养。

    1.1.2 实验试剂及仪器 秦艽(货号DYQ8080)由上海恒斐生物科技有限公司提供；尼莫地平(货号D14202003034)由山东新华制药股份有限公司提供；2，3，5-三苯基氯化四氮唑(TTC)(货号298964)由Amresco公司提供；大鼠白细胞介素(IL)-6酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒(货号EK0412)由上海彩佑实业有限公司提供；苏木精-伊红(HE)染色试剂盒(ab245880)、大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒(货号ab100785)、RIPA裂解液(货号ab288006)、二喹啉甲酸法(BCA)蛋白检测试剂盒Ⅱ(货号ab287853)、兔源RAS一抗(货号ab52939)、兔源甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)一抗(货号ab181602)、兔源RAF一抗(货号ab137435)、兔源p-RAF一抗(货号ab173539)、兔源ERK1/2一抗(货号ab32537)、兔源p-ERK1/2一抗(货号ab192591)、羊抗兔二抗(货号ab150077) ......