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编号:208340
沙棘多糖对脑胶质瘤大鼠的抑瘤作用及对HMGB1、MGMT及TLR4表达的影响
http://www.100md.com 2023年2月15日 中西医结合心脑血管病杂志 2023年第1期
莫唑胺,细胞周期,1材料与方法,2结果,3讨论
     徐大伟,刁玉领,惠 磊,周文科,汲乾坤

    脑胶质瘤由大脑和脊髓胶质细胞癌变所产生,约占所有原发性颅脑肿瘤的51.4%,呈现细胞异常增殖、快速弥漫性浸润和抗凋亡的侵袭性特征,影响脑组织功能,对病人生命健康及生活质量造成极大威胁[1-2]。目前脑胶质瘤的临床治疗主要依靠外科手术,并辅以新的放疗(适形、调强放疗)和药物化疗,但病人生存率仍然较低。因此,开发安全有效的药物对提高病人生存质量具有重要意义。沙棘的浆果是传统药用食品,具有活血散瘀、化痰宽胸、补脾健胃、清热止泻、缓解疼痛等功效,在肿瘤预防治疗、增强免疫、抗炎、抗衰老等方面具有明显效果[3-4]。沙棘多糖(hippophae rhamnoides polysaccharide,HRP)是从沙棘果中提取的一种多糖类物质,具有抑菌、抗氧化、抗病毒、抗肿瘤、防衰老以及肝脏保护等作用[5]。目前,HRP对脑胶质瘤的药理活性及作用机制研究较少,本研究拟通过建立脑胶质瘤大鼠模型,探讨HRP的抑瘤作用及可能机制,为HRP类药物的研究和脑胶质瘤的临床治疗提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞系和实验动物 大鼠C6脑胶质瘤细胞株购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠60只,7周龄,体质量(200±20)g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司[SCXK(京)2016-0011]。购入后在SPF环境中适应性饲养1周。

    1.1.2 主要试剂和仪器 HRP(纯度>90%)购自上海诗丹德标准技术服务有限公司;替莫唑胺购自北京嘉瑞时代科技有限公司;兔抗大鼠高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)一抗、O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA-methyltransferase,MGMT)一抗、Toll样受体4(Toll-like Receptor 4,TLR4)一抗购自美国Thermo Fisher Scientific公司,小鼠抗大鼠β-actin一抗购自美国Santa Cruz公司,HRP标记的羊抗兔二抗、HRP标记羊抗鼠二抗购自英国Abcam公司;磁共振成像(MRI)扫描仪(MiniMR-60实验动物核磁共振成像仪)购自上海纽迈电子科技有限公司;流式细胞仪购自美国BD公司;蛋白凝胶电泳仪购自上海天能科技有限公司 ......

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