参芪益心方对异丙肾上腺素致心肌损伤大鼠IRE1、Cleaved Caspase-3的影响及作用机制研究
内质网,1材料与方法,2结果,3讨论
郭继芳,韩宇博,金 娟,刘 莉内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)是细胞对外界刺激的一种应激响应,强烈或持续的刺激激活凋亡信号通路,引起细胞凋亡[1-2]。抑制ERS可保护心肌,是防治心血管疾病的靶点之一[3]。本研究应用异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导SD大鼠心肌损伤,给予参芪益心方治疗,检测肌醇需求酶1(inositol-requiring Enzyme 1,IRE1)、裂解凋亡蛋白酶-3(Cleaved Cysteine-containing aspartate-specific protease-3,Cleaved Caspase-3)的变化情况,探讨参芪益心方对心肌损伤的保护机制与抑制ERS的关联性。
1 材料与方法
1.1 实验动物 无特定病原体(specific pathogen free animal,SPF)级SD雄性大鼠40只,6~8周龄,购于哈尔滨医科大学实验动物学部,许可证号:SCXK(黑)2019-001,批次No.230729211100021921,体质量(200±20)g。动物饲养于牡丹江医学院医药研究中心四楼动物饲养室,室温22 ℃,湿度60%。动物实验设施使用许可号:SYXK(黑)2019-003。本实验通过牡丹江医学院实验动物福利与伦理委员会批准,批准文号:20210901-10。
1.2 主要药物及试剂 参芪益心方(人参20 g,黄芪20 g,仙鹤草30 g,白术15 g,茯苓20 g,淫羊藿20 g,桂枝10 g,葶苈子15 g,丹参15 g,益母草15 g,甘草10 g,安徽药知源中药饮片有限公司,浓煎至含生药5 g/mL),盐酸异丙肾上腺素(规格:每瓶5 g,批号:S31064,上海源叶生物科技有限公司),盐酸曲美他嗪片[规格:每片20 mg,批号:2019110,批准文号:国药准字:H20055465,施维雅(天津)制药有限公司];苏木素(北京索莱宝生物科技有限公司),伊红(安徽雷根生物技术有限公司),蛋白裂解液(RIPA裂解液),PMSF(蛋白酶抑制剂)、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)蛋白上样缓冲液、SDS-PAGE凝胶配制Kit ......
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