miR-433通过JAK2/STAT3信号通路调控氧化应激干预术后认知功能障碍的实验研究
柱状图,海马,1材料与方法,2结果,3讨论
许琼冠,欧阳一彬,谢镇明术后认知功能障碍(POCD)是全身麻醉后影响中枢神经系统的常见并发症之一。POCD可延长术后的恢复时间,并长期影响病人的生活质量。60岁以上病人POCD发生率较高,严重影响了老年病人的生活能力和生活质量[1]。有研究表明,年龄增加、大手术、心肌梗死史、酒精依赖史、既往存在认知功能障碍为POCD的独立危险因素[2]。虽然POCD发病机制尚未明确,先前研究表明,炎症反应、氧化应激、蛋白表达变化、细胞凋亡和中枢胆碱能系统的退化可能是POCD发病的因素[3-4]。迫切需要了解导致POCD的潜在机制,并找到有效的方法保护术后认知功能。酪氨酸激酶2(JAK2)/转录激活因子3(STAT3)通路参与较多生理过程,包括炎症、增殖、分化和发育[5],可能有助于驱动暴露于细胞因子后神经元的存活反应。有研究证实,JAK2/STAT3通路参与了短暂性局灶性脑缺血后的抗凋亡过程[6]。阿尔茨海默病动物模型中,激活JAK2/STAT3通路改善了空间学习和记忆功能[7]。MicroRNA(miRNA)是一类短链非编码RNA,通过mRNA降解或翻译在抑制靶基因表达中发挥关键作用。目前,在哺乳动物的脑组织中发现了大量的miRNA,其与脑组织发育、神经元分化和高级神经功能(如学习和记忆)有关[8],同时与神经退行性疾病、精神障碍和脑肿瘤等疾病有关[9]。相关研究显示,在阿尔茨海默病和帕金森病中,miRNA参与调节神经元细胞周期控制和凋亡[10],同时参与调节缺血后脑损伤的病理过程[11]。miR-433位于12号染色体上,有研究显示,miR-433在缺氧条件下可调节神经元的增殖和迁移[12],提示miR-433在调节神经细胞生物学功能方面具有重要作用。miR-433在POCD的神经发病机制中的作用尚未明确。本研究探讨miR-433和JAK2/STAT3信号通路在大鼠术后认知障碍中的确切作用和相关机制。
1 材料与方法
1.1 实验试剂与仪器 SYBR Premix Ex Taq试剂盒(北京优尼康生物科技有限公司);PrimeScript RT Reagent Kit试剂盒、miRcute miRNA cDNA第一链合成试剂盒[宝日医生物技术(北京)有限公司];原位末端凋亡(TUNEL)染色试剂盒(Roche公司);ABI 7500聚合酶链式反应(qPCR)系统(Applied Biosystems公司);BX51显微镜(奥林巴斯公司) ......
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