李文涛,秦合伟,牛雨晴

    动脉粥样硬化(AS)是缺血性心脑血管疾病的主要病理基础,目前对于缺血性心脑血管疾病的防治不理想,抗血小板、调血脂、血管介入疗法等均难以彻底解决动脉再狭窄的根本问题[1],中医药的整体观念、辨证论治、多靶点作用在防治AS方面具有优势。研究显示,血管内皮细胞在受外界因素刺激导致损伤时,引起细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子(VCAM-1)、白细胞介素-8(IL-8)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)等分子呈现高表达,进而促进单核细胞与内皮的黏附和浸润,促进AS的发生发展[2]。在AS的病变过程中,长链非编码RNA-TUGl(lncRNA-TUGl)在血管内皮细胞中呈现高表达,而敲低lncRNA-TUGl表达能抑制内皮细胞凋亡,减少低氧及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激下的内皮细胞损伤,降低ICAM-1、VCAM-1表达水平,抑制p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的活化,因此,lncRNA-TUGl参与内皮炎症损伤和AS相关疾病[3]。本课题组既往研究发现,化痰祛瘀法中药具有明显的防治AS的作用[4-8],本研究旨在观察化痰祛瘀法中药抗AS的作用机制是否与靶向调控lncRNA-TUG1抑制p38 MAPK信号通路活化及其下游信号T-p38、p-p38表达,从而抑制炎性反应、调控血脂、保护血管内皮损伤有关。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 无特定病原体(SPF)级健康雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠60只,体质量(20±2)g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司[动物许可证号:SCXK(京)2016-0006],饲养于河南中医药大学第二附属医院动物实验中心[动物许可证号:SCXK(豫)2016-0009],(22±1)℃恒温、60%～75%恒湿、12 h循环照明,自由摄食、饮水。经河南中医药大学第二附属医院动物实验伦理委员会审核通过,本实验设计方案符合安全性和公平性原则,实验动物符合国家对医学实验动物的有关要求[4],伦理审核批准标号:20190622。

    1.2 实验药物 研究所用化痰祛瘀法中药组方为血管软化丸,组成:山楂30 g,陈皮12 g,清半夏10 g,黄芪30 g,丹参12 g,三七12 g,莱菔子15 g。方中所有中药均来源于河南中医药大学第二附属医院药剂科。按照“人和动物体表面积折算的等效剂量比率表”换算成低、高2个剂量(43.2 g/kg、86.4 g/kg),分别相当于60 kg成人临床用量等效量的11.6倍和23.3倍,医院煎药房按照要求煎煮成生药,含量为1.738 g/mL、3.476 g/mL ......