齐贵彬,高建步,张明磊,张永杰,王 星,彭小荷,董晓双,李京倡,刘 琳

    我国冠心病的发病率和死亡率呈逐年升高的趋势,严重威胁居民的生命安全[1]。近年来,虽然冠心病诊疗技术得到了快速发展,但病人预后并未得到明显改善,主要与心血管不良事件发生率未有效降低有关[2]。目前,临床仍缺少评估冠心病病人预后的指标,给治疗方案的制定带来困扰。随着对微小RNA(miRNAs)在多种疾病中发生、发展作用的深入研究,逐渐发现miRNAs可作为心血管疾病预后的评价指标[3]。相关研究显示,miR-34a在乳腺癌、肺癌、前列腺癌等多种恶性肿瘤组织中异常表达,并能促进肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭[4-5];miR-145低表达参与胃癌、膀胱癌、宫颈癌、肝癌的发生与进展[6]。研究显示,miR-34a、miR-145在冠心病病人循环中存在异常表达,但与冠状动脉病变程度的关系和相关机制仍缺少深入研究[7-8]。因此,本研究探讨冠心病病人血清miR-34a、miR-145表达与冠状动脉病变程度的关系及相关机制。

    1 对象与方法

    1.1 研究对象 选取2018年3月—2019年5月本院收治的冠心病病人60例作为冠心病组,其中,男32例,女28例;年龄47～65(56.79±5.41)岁。另选取健康志愿者60名作为对照组,其中,男34例,女26例;年龄45～65(56.28±4.95)岁。两组性别、年龄比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。本研究经过医院伦理委员会审批,病人及家属知情同意并签署知情同意书。

    1.2 纳入与排除标准 纳入标准:①经冠状动脉造影检查,存在1支及以上的主要冠状动脉血管狭窄程度>50%;②能够正常沟通交流,自愿参与本研究者。排除标准:合并恶性肿瘤、感染性疾病、免疫系统功能异常者。

    1.3 主要材料与试剂 人血管内皮细胞株购于上海研谨生物有限公司;液体样本总RNA提取试剂盒购于上海西宝生物科技有限公司;胎牛血清、无血清细胞冻存培养基(RPMI)-1640购于上海源培生物科技股份公司;miR-34a minics质粒、miR-34a inhibitor质粒、miR-145 minics质粒、miR-145 inhibitor质粒均由上海吉玛公司构建;脂质体2000转染试剂购于美国Sigma公司;鼠抗人沉默信息调节因子1(SIRT1)单克隆抗体、鼠抗人胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)单克隆抗体购于上海博湖生物有限公司 ......