葡萄籽多酚对心肌梗死大鼠NF-κB信号通路及肾功能的影响
肾脏,1材料与方法,2结果,3讨论
武报佳,郭 华,邢慧敏,赵 睿,孙 波,马 冬心肌梗死是高发的心血管疾病,随着人科生活压力增加及生活习惯改变,心肌梗死发病率逐渐升高,且呈年轻化趋势,且致死率较高,严重威胁人们的生命安全[1]。有研究显示,随着心肌梗死疾病恶化并发展为急性肾损伤的发病率升高,美国研究中心对4万多例急性心肌梗死病人进行随访发现,超过5.2%病人发生不同程度的急性肾损伤[2]。有研究证实,心肌梗死病人肾功能指标血肌酐(Cr)含量变化证实病人肾小球过滤功能存在异常[3]。核转录因子κB (nuclear factor-kappa B,NF-κB)是一种具有生物调节作用的蛋白质,可介导炎症反应、细胞生物活性及免疫应答等,其在心肌梗死生理病理中发挥着重要作用[4]。NF-κB受Rel家族及IκB家族影响,受到细胞外刺激后与IκB激酶α/β(IκKα/β)形成复合物,游离的NF-κB进入细胞核发挥靶基因调控作用。
葡萄籽多酚(grape seed polyphenols,GSP)富含多种化学成分,是从葡萄籽种中提取的具有抗氧化作用的天然物质,具有无毒性、生物利用度高等优点[5]。葡萄籽多酚可发挥抗氧化及清除自由基等作用,改善心血管疾病。朱建鸿等[6]研究表明,葡萄籽多酚对心血管合并动脉硬化、糖尿病及高血糖具有保护作用。关于心肌梗死肾功能的研究处于探讨阶段,本研究观察葡萄籽多酚对心肌梗死大鼠NF-κB信号通路及肾功能的影响,为相关研究提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 无特定病原体(SPF)级SD雄雌各半大鼠50只,鼠龄6周,体质量200~300 g,许可证号:SCXK(浙)2019-0010。饲养环境:湿度为55%,温度为25 ℃,模拟明暗交替无菌饮食2周,定时清洗、消毒鼠笼,实验符合《实验动物管理条例》规定管理规定。
1.2 实验药物、试剂与仪器 葡萄籽多酚(陕西锦泰生物工程有限公司,JT-10236);戊巴比妥钠(上海行知化工厂,921019);阿托品(河南润弘制药股份有限公司,20150528);青霉素钠(江西大赣农动物药业有限公司,140591248);NF-κB抗体(深圳市豪地华拓生物科技有限公司,PL0403111);NF-κBp65抗体(上海恒斐生物科技有限公司,ab140751);IκKβ(上海雅吉生物科技有限公司,YS-13644R)。苏木素染液(北京伊塔有限公司,YT8370);3,3′-二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒(上海雅吉有限公司,I026);实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)试剂盒(美国ABI公司,7000);cDNA第一链合成试剂盒(北京天根有限公司,KR104);IP裂解液(北京百奥莱博有限公司,SY0318);二喹啉甲酸法(BCA)蛋白浓度测定试剂盒(南京诺唯赞有限公司,E112-01) ......
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