杨 萍,代 天,刘 波,邹 勇,赵 谦,张苏川

    糖尿病是一种高发的疾病,病人血糖浓度长期处于高水平,引发胶原纤维过度积累,造成多种组织器官纤维化变性,其中心肌纤维化是糖尿病病人常见的并发症,可严重损伤心脏的收缩、舒张功能,导致心力衰竭、恶性心律失常和心源性猝死等心脏疾病,是晚期糖尿病病人死亡的主要原因[1-2]。高糖环境可引发机体严重的炎症反应,促使心肌细胞凋亡,进而导致心肌组织胶原沉积,引发心肌纤维化[3-4]。丝裂原细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)通路在心肌梗死病理过程中发挥着重要调控作用,降低MEK、ERK磷酸化水平,可起到抗炎、抗氧化作用,减轻心肌组织炎症损伤,抑制成纤维细胞分化,缓解心肌纤维化,修复心功能,由此可知MEK/ERK信号通路是改善心肌纤维化的主要治疗靶点[5-6]。青蒿琥酯是青蒿素的一种半合成衍生物,具有抗疟疾、抗炎、调节免疫等广泛的生物学作用,可降低促炎因子表达,减轻糖尿病大鼠肾组织炎症损伤,还可抑制其视网膜病变[7-8]。本研究观察青蒿琥酯对糖尿病大鼠MEK/ERK通路及心肌纤维化的影响。

    1 材料与方法

    1.1 动物 清洁级SD大鼠[生产许可证号:SCXK(沪)2017-0004,购自上海茂生衍生物科技有限公司],雌雄各半,体质量200～240 g,饲养在温度25 ℃、相对湿度55%的本院动物房中,将室内环境维持在清洁级,并保持安静、通风良好,自然照明,大鼠自由进食、饮水。

    1.2 主要试剂及仪器 青蒿琥酯购自上海宝曼生物科技有限公司[高效液相色谱(HPLC)≥98%,货号D1085];盐酸二甲双胍片购自中美上海施贵宝制药有限公司(规格:每片0.5 g,国药准字H20023370);链脲佐菌素购自西安热默尔生物科技有限公司(纯度99%,货号0210055701);Masson染色试剂盒购自上海信裕生物科技有限公司(货号XY-4422-1);大鼠肌酸激酶同工酶(CK-MB)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒购自上海雅吉生物科技有限公司(货号YS06433B);大鼠肌钙蛋白I(cTnI)ELISA试剂盒购自厦门仑昌硕生物科技有限公司(货号LCS34521);大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)ELISA试剂盒、兔源磷酸化MEK(p-MEK)一抗、兔源MEK一抗、兔源ERK一抗、兔源甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)一抗及兔源p-ERK一抗、羊抗兔二抗购自美国Abcam公司(货号分别为ab5603、ab100772、ab96379、ab178876、ab32537、ab1194、ab192591、ab150077);BCA试剂盒购自上海碧云天公司(货号P0011);RIPA裂解液购自南京森贝伽生物科技有限公司(货号BI-WB012)等 ......