程 瑶,翟冠楠,刘 强,郭延林

    卒中后抑郁(post-stroke depression,PSD)是脑卒中的并发症之一[1]。PSD是引起脑卒中病人死亡及自杀率升高的主要并发症,严重影响脑卒中病人生命健康[2]。PSD病理机制复杂,其发病机制未完全阐明。目前,有研究认为,脑卒中后神经元异常损伤凋亡是引起PSD发生发展的关键原因之一[3]。近年来,有研究发现,微小核糖核酸-10a(microRNA-10a,miR-10a)可靶向调控脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达,影响海马神经元细胞增殖及凋亡,从而参与精神分裂症发生发展过程[4],预示miR-10a/BDNF通路介导的神经元细胞凋亡也可能参与PSD发生发展过程。帕利哌酮为第二类抗精神病类药物[5]。有研究发现,帕利哌酮也可促进脑卒中后精神障碍病人个人及社会功能恢复,且临床效果较好、不良反应少、安全性较高[6]。但帕利哌酮改善脑卒中后精神障碍及PSD的具体生物学机制还不甚明确。本研究建立PSD大鼠模型,从miR-10a/BDNF通路方面,对此进行探讨,以期阐明帕利哌酮在PSD发生发展中的可能机制,并为其开发应用提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物 健康清洁级雄性SD大鼠,6～8周龄,体质量220～240 g,购自广州赛业百沐生物科技有限公司,生产许可证号:SCXK(粤)2020-0055。本实验经我院动物伦理委员会批准同意,符合3R原则,即减少(reduction)、优化(refinement)和替代(replacement)。

    1.1.2 主要试剂及仪器 帕利哌酮(货号:JKLN015804a),购自上海经科化学科技有限公司;尼氏及脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 (TUNEL)染色试剂盒(货号:YT8907,CDLG-3559),购自北京伊塔生物科技有限公司及武汉纯度生物科技有限公司;BDNF、酪氨酸受体激酶B(TrkB)、磷酸肌醇3激酶(PI3K)、凋亡相关蛋白半胱天冬酶-3(Caspase-3)抗体(货号:ab108319,ab187041,ab154598,ab184787,购自美国abcam公司);核糖体蛋白S6激酶α(RPS6KA1)抗体(货号:K23422),购自北京百奥莱博科技有限公司;RNA提取试剂盒(货号:TR205-50),购自北京天漠科技开发有限公司;逆转录试剂盒(货号:4368814),购自武汉极捷生物科技有限公司 ......