李旭峰,冷冬月

    慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)病人患心血管疾病(cardiovascular diseases,CVD)的风险越来越大[1-2]。尽管在慢性肾病的发展过程中,各种导致心血管并发症的危险因素已被广泛认识,但仍无法解释心血管疾病的具体分子机制。血管钙化(vascular calcification,VC)是慢性肾病的主要并发症之一,主要发生在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)中,在心血管疾病中发挥关键作用,是心血管疾病的重要危险因素[3]。血管钙化的形成与VSMCs的成骨分化和凋亡、不稳定和负载钙和磷酸盐的细胞外小泡的释放等病理机制有关[4]。在慢性肾病的病因中,磷酸钙盐的异常沉积与血管钙化密切相关[5]。研究表明,血清无机磷酸盐升高是慢性肾病人群中血管钙化和心血管发病率和死亡率的危险因素[6-7]。因此,研究高磷诱导VSMCs钙化的具体分子机制具有重要意义。

    益气活血通络方由黄芪、丹参、当归、赤芍、红花、桃仁、川芎、地龙组成,具有补益肾气、活血通络的功效。临床研究发现,益气活血通络方对慢性肾脏疾病的肾功能具有较好的保护作用,可用于慢性肾衰竭、糖尿病肾病的治疗,可控制血糖水平,有效降低尿微量白蛋白、血肌酐、尿素氮水平,提高肾小球滤过率,改善肾功能[8-10]。而益气活血通络方对慢性肾病病人的血管钙化是否具有改善作用还未可知。因此,本研究通过高磷诱导VSMCs钙化,初步探究益气活血通络方对血管钙化的影响及可能的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 动物

    无特定病原体(SPF)级雄性Sprague Dawley(SD)大鼠18只,体质量(200±20)g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证为SCXK(京)2019-0009。大鼠在12 h明暗交替、温度(20±2)℃、相对湿度45%～60%的环境中饲养。所有动物实验均获得动物保护和使用机构委员会(IACUC)的批准。

    1.2 药品及试剂

    1.2.1 药品

    益气活血通络方,组方:黄芪30 g,丹参20 g,当归15 g,赤芍10 g,红花10 g,桃仁10 g,川芎20 g,地龙10 g。以上药材均为中药配方颗粒,购自华润三九医药股份有限公司,使用时将所有配方颗粒混匀后加入蒸馏水配制成混悬液。按照人与大鼠体表面积换算的方法计算大鼠给药剂量。人体重以70 kg计,换算大鼠的等效剂量为人的6.3倍 ......