王琰淏,李 燕,张松雨,周晓铎,王 颖

    心力衰竭是多种心脏疾病发展到终末期的严重并发症,急性心力衰竭通常是慢性心力衰竭急性失代偿,引发心力衰竭,症状及体征急速恶化[1]。流行病学调查显示,我国心力衰竭年新增病人数量逐年增加,发病率与年龄呈正相关,且预后差,5年病死率超过60%[2]。因此,寻找有效的治疗急性心力衰竭药物,对改善预后、提升后期生存率意义重大。西红花是我国名贵中药材,具有活血化瘀、解郁安神、凉血解毒的功效,治疗月经不调、经闭、产后瘀血腰痛等妇科疾病及冠心病、心绞痛等心脑血管疾病疗效显著[3]。西红花酸是西红花主要活性成分之一,体外实验研究表明,西红花酸可抑制大鼠心肌细胞中的Ca2+瞬变和收缩力,提示其具有治疗心血管疾病的潜在作用[4]。然而,目前关于西红花酸治疗急性心力衰竭的研究较少。本研究通过建立急性心力衰竭大鼠模型,采用西红花酸干预,观察其对该病的治疗效果,以期为临床应用提供实验基础。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    无特定病原体(SPF)级SD大鼠45只,雄性,8周龄,体质量(300±20)g,购自上海杰思捷实验动物有限公司,生产许可证号:SCXK(沪)2018-0004。

    1.2 实验药物、试剂与仪器

    西红花酸(纯度99%,上海沪震实业有限公司),微小RNA(microRNA,miR)-155激活剂腺病毒(上海汉恒生物科技有限公司),逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)试剂盒,双荧光素酶检测试剂盒(上海群己生物科技有限公司),兔抗大鼠脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、酪氨酸激酶受体B(tyrosine receptor kinase B,TrkB)、p-TrkB一抗(英国Santa公司)。

    VEVO3100小动物超声成像系统(加拿大VisualSonics公司),PowerLab 多导生理记录仪(澳大利亚ADInstruments公司),SAR1000动物呼吸机(上海牧荣生物科技有限公司),STELLARIS DLS显微镜(德国Leica公司),Scientific MK3酶标仪、E-Gel Imager凝胶成像系统(美国Thermo Fisher公司)。

    1.3 急性心力衰竭模型的建立

    参照相关文献[5],取全部SD大鼠,腹腔注射25%乌拉坦麻醉后四肢仰卧固定于手术台,生理记录仪电极连接大鼠四肢,颈部、腹部及胸腔部位备皮消毒,切开颈部后分离气管,切开一小孔行气管插管术,连接呼吸机,行开胸术,暴露心脏,随机选取10只大鼠不处理设置为Sham组,剩余大鼠将心包撕开,缝合线穿过左心耳下结扎,以左心室表面颜色变白,心脏脉动减弱,内压最大上升速度(dp/dtmax)至标准值60%以下且持续5 min不上升为建模成功标准,缝合胸腔,待大鼠呼吸平稳后撤去呼吸机,缝合颈部皮肤,术后注射青霉素钠1×105U防止感染,每日1次,持续3 d ......