陈祖乔,王 芳,尹涛源

    缺血性心脏病具有较高的发病率和死亡率,缺血后,由手术或药物引起的溶栓再灌注可能进一步促进心脏损害,这种现象称为心肌缺血/再灌注(myocardial ischemia/reperfusion,MI/R)损伤[1-2]。MI/R损伤的潜在机制尚未明确,关键因素包括能量代谢紊乱、氧化应激、钙超载、心肌细胞凋亡、自噬及血管内皮细胞功能障碍[3]。在临床上,MI/R损伤对病人的治疗策略有较大影响,可能引发一系列不良并发症,通过干预MI/R损伤后心肌内相关反应可延缓或减轻心肌损伤,是改善MI/R损伤的重要策略。

    依托咪酯是一种非巴比妥类静脉镇静药,也是咪唑衍生物静脉麻醉剂,通过与外周α2B受体结合,引起外周血管收缩,并在诱导麻醉期间维持稳定的血流动力学状态[4]。依托咪酯可避免麻醉诱导后低血压发生,降低心肌损伤发生率,改善心脏术后病人预后[5]。相关研究表明,依托咪酯对脑缺血再灌注与MI/R损伤均有一定的保护作用[6-7]。本研究通过构建MI/R大鼠模型,观察依托咪酯对MI/R大鼠心肌功能的作用基础上探讨可能作用的相关机制,并测定其对脂代谢的作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    健康清洁级SD大鼠65只,雄性,6～8周龄,体质量260～300 g,由海南药物研究所有限责任公司提供。将大鼠饲养于无菌动物饲养箱内,环境温度22～25 ℃,相对湿度40%～50%,12 h/12 h昼夜交替,期间大鼠自由饮水、摄食。本研究通过我院伦理委员会批准。

    1.2 实验试剂与材料

    依托咪酯[江苏恩华药业股份有限公司,批号:H20020511;规格:10 mL(20 mg)];酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒(R&D Systems公司);总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测定试剂盒(北京中生生物工程公司),脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所);苏木精-伊红(HE)染色试剂盒(上海碧云天生物研究所);末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)细胞凋亡检测试剂盒(北京博奥森生物公司);聚偏二氟乙烯(PVDF)膜(美国Millipore公司);抗体Beclin-1、p62、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ(英国Abcam公司);辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔和β-actin抗体(美国Santa Cruz公司);二喹啉甲酸(BCA)蛋白检测试剂盒和增强型电化学发光(ECL)溶液(南京凯基生物有限公司);其他试剂均为国产分析纯 ......