杨 丽,张侃迪,张俊峰

    心血管疾病是全球死亡的主要原因,2017年导致1 700多万人死亡,其中冠心病是常见的死亡原因。在我国,冠心病是人类死亡的主要威胁,与西方国家冠心病发病率相比,我国的发病率较低[1]。然而,由于庞大的人口基数,2016年我国报告的冠心病病例约为2 300万例。糖尿病是一种以血糖、血脂显著升高为特征的糖脂代谢紊乱,心血管疾病并糖尿病病人更容易受到心血管疾病的影响。此外,糖尿病病人的心血管病死亡率明显高于非糖尿病病人,为2～3倍[2]。糖尿病病人心脏结构和功能异常,易受心肌缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)的影响[3]。在心肌缺血再灌注损伤中,尽管血流再灌注恢复,但缺血心脏损伤不可逆,这种损伤往往引起心肌细胞的坏死和凋亡,线粒体功能障碍,从而导致长期预后不良,甚至死亡[4];有证据表明,糖尿病心脏表现出对心脏保护治疗的抵抗[5],因此,与非糖尿病病人相比,糖尿病可使心肌IRI加重。然而,目前缺乏针对糖尿病病人心肌IRI的有效治疗。柚皮苷(Naringin,Nar)主要是从柚子和橙子中提取的一种天然类黄酮苷[6]。研究发现其能够通过抗氧化、抑制细胞凋亡等机制对心肌缺血再灌注有抑制作用[7]。柚皮苷对心肌IRI的作用可见报道[8-9],而关于柚皮苷对糖尿病心肌缺血再灌注的研究报道较少。本研究旨在研究柚皮苷对糖尿病大鼠心肌IRI氧化应激和凋亡的影响,并探讨其机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物

    雄性SD大鼠24只,体质量200～250 g,购于上海杰思捷实验动物有限公司,生产许可证号:SCXK(沪)2018-0004。饲养于上海市第九人民医院动物房,本研究经本院动物伦理委员会批准。

    1.1.2 试剂与仪器

    柚皮苷购自上海同田生物技术有限公司;超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒购于上海碧云天生物科技有限公司;原位末端标记测定法(TUNEL)试剂盒和蛋白酶K购自Servicebio公司;二氨基联苯胺(DAB)显色剂购自DAKO。鼠抗B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)、Bax单克隆抗体购自Santa公司;Bcl-2、Bax兔抗鼠二抗购自Santa公司;蛋白酶K购自Roche公司;脱水机(武汉俊杰电子有限公司);病理切片机(上海徕卡仪器有限公司);烤箱(上海福玛实验仪器有限公司);涡旋混合器(Servicebio);显微镜(CIC) ......