王久和,张 晶,李彬彬,王慧敏

    动脉粥样硬化(AS)是炎性因子及趋化因子等表达升高导致的一系列病理改变[1]。炎症反应存在于AS疾病发生发展的各个阶段,核转录因子κB(NF-κB)在AS疾病中表达升高,其激活可以加快脂质因子、炎性细胞因子表达,提高血管炎症水平,促进斑块进展[2]。磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)是目前研究较广泛的信号通路,该信号通路可参与AS的发生发展,且通过抑制PI3K/AKT激活可有效减少AS的形成[3]。内质网应激(ERS)可贯穿AS发展的始终,内质网上的新生肽链中葡萄糖调节蛋白78抗原(GRP78)表达激活后可导致细胞凋亡[4]。ERS可通过增加巨噬细胞凋亡而加重AS斑块的形成[5]。因此,减少AS过程中的ERS对于改善疾病意义重大。中医学中无AS之称,但根据临床表现可将其归属于“眩晕”“健忘”“痴呆”“胸痹”等范畴,病机与气血失养、肾精亏虚及情志失调等相关,建议采用健脾益气、滋阴养血及补益肝肾为主的方法治疗[6]。心安Ⅰ号胶囊是用于治疗冠心病心律失常的中成药,具有活血、养阴、通络的作用[7]。本研究探讨心安Ⅰ号胶囊对AS大鼠血管炎症及PI3K/AKT/GRP78信号通路的影响,为AS疾病的治疗及机制研究提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验仪器与试剂

    酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒(中国天津安诺瑞康生物,批号:208180418),二氨基联苯胺3(DBA)显色液(中国北京索莱宝科技,批号:20181120),磷酸盐缓冲液(PBS)(美国Santa Curz),增强化学发光法(ECL)试剂盒(中国上海碧云天生物,批号:82417170930),辣根酶标记羊抗兔抗体IgG(中国北京中山金桥生物,批号:136080),甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)单抗(中国上海生工生物,批号:1914526843);PI3K单抗、AKT单抗及GRP78单抗(中国武汉博欧特生物科技有限公司,批号:orb137259,10763-T16,102056-T40-50),C2500-R-230V型微型高速离心机(美国labnet);DYCZ-24DN型垂直电泳槽、DYCZ-40型电泳仪电源(中国北京六一仪器厂生产)。

    1.2 药物

    心安Ⅰ号胶囊为我院院内制剂,由黄芪、炙甘草、麦冬、丹参、玉竹组成,经水提取、浓缩、干燥后低温保存,每克含有生药2.5 g;阿司匹林购自广东九明制药有限公司,每片0.3 g,国药准字:H44021139 ......