邓楚珺,孟胜喜,陈慧泽

    癫痫(elilepsy,EP)是以反复性、发作性、短暂性、刻板性的中枢神经系统功能失常为特征的脑部神经元高度同步化且常具自限性的异常放电所导致的综合征。由于异常放电神经元的位置不同,放电和扩散的范围不等,病人发作可表现为感觉、运动、意识、精神、行为、自主神经功能障碍或兼而有之[1-2]。目前,全球约有7 000万例以上的癫痫病人[3],我国约有900万例以上的癫痫病人,其中活动性癫痫病人有500万～600万例,同时每年新发癫痫病人65万～70万例[4]。恒清Ⅴ号方是本课题组经过长期临床实践总结、归纳和验证研发的治疗癫痫中药经验复方。基于前期研究成果,本实验验证中药复方恒清Ⅴ号方的抗癫痫作用,并进一步探讨其作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 仪器

    XY-1B系列精密电子天平(上海奕宇电子科技有限公司);5811型低温高速离心机(Eppen-dorf公司);Epoch酶标仪(BioTek公司);超微量紫外可见分光光度计(Thermo Scientific公司);正置荧光显微镜[尼康仪器(上海)有限公司]。

    1.1.2 药物与试剂

    丙戊酸钠缓释片[商品名:德巴金,生产企业:赛诺菲(杭州)制药有限公司,规格:500 g×30片,国药准字H20010595,lot:BHG0357)];戊四唑(pentylenetetrazole,PTZ,上海源叶生物科技有限公司,lot:S48261);谷氨酸(Glu)试剂盒(lot:A089-1-1)和谷氨酰胺合成酶(GS)测定试剂盒(lot:A089-1-1),均购自南京建成生物工程研究所。超敏C反应蛋白(hs-CRP)、热休克蛋白70(HSP-70)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒购自上海初态生物科技有限公司。GFAP、Fos抗体及免疫组织化学试剂盒,购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司。恒清Ⅴ号方组方:胆南星15 g,僵蚕10 g,全蝎2 g,石菖蒲15 g,蝉蜕10 g,川芎15 g。由上海交通大学附属第六人民医院中药房提供。按处方比例称取以上中药药材,加10倍量水,浸泡0.5 h,煎煮3次,每次40 min,过滤,合并以上3次滤液,37 ℃水浴加热浓缩,根据临床实际用药情况对药液进行浓缩处理,并以中质量浓度匹配临床的实际用药浓度 ......