赵俊 陈勇 吴春芳

    摘要 目的：探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)HOX转录反义RNA(HOTAIR)在脊髓损伤凋亡和自噬中的作用及相关机制。方法：将雄性SD大鼠随机分為假手术组(Sham组)和模型组(SCI组)。构建缺氧缺糖诱导的SY-SH5Y细胞模型(OGD模型)，将SY-SH5Y细胞分为Control组、OGD组、OGD+Vector组、OGD+pcDNA-HOTAIR组、OGD+pcDNA-HOTAIR+NC mimic组、OGD+pcDNA-HOTAIR+miR-17 mimic组。通过脊髓损伤运动功能(BBB)评分评估大鼠运动功能的恢复能力；通过双荧光素酶报告基因实验分别检测HOTAIR和miR-17、miR-17和Beclin-1之间的靶向关系；实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测大鼠脊髓组织和细胞中HOTAIR、miR-17、Beclin-1 mRNA的表达；蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠脊髓组织和细胞中Beclin-1、微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、P62蛋白的表达；流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果：与Sham组比较，SCI组大鼠BBB评分下降，脊髓组织中HOTAIR水平降低，miR-17水平升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。与Control组比较，OGD组处理的SY-SH5Y细胞中HOTAIR水平降低，miR-17水平升高，神经元凋亡率升高，LC3Ⅱ蛋白表达降低，P62蛋白表达升高，差异均有统计学意义(P<0.05)；与OGD+Vector组比较，OGD+pcDNA-HOTAIR组细胞中HOTAIR水平升高(P<0.05)，神经元凋亡率降低(P<0.05)，LC3Ⅱ蛋白表达升高(P<0.05)，P62蛋白表达降低(P<0.05)，而自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)逆转了这一结果(P<0.05) ......