严宪才 李亮 吴志光 刘锦文 冯劲立 杨宇琦 周耀辉

    摘要：目的 觀察分泌型卷曲相关蛋白1(Sfrp1)调控无翼相关整合位点(Wnt)信号通路对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的体外心肌细胞损伤的影响。方法：体外培养大鼠心肌细胞H9c2，设置空白对照组(control组)、9型腺相关病毒载体组(aav9-Sfrp1组)和无Sfrp1基因组(aav9-NC组)；control组仅进行常规培养，aav9-Sfrp1组和aav9-NC细胞分别转染aav9-Sfrp1和aav9-NC后，使用AngⅡ诱导心肌肥大模型。采用细胞计数试剂盒-8检测细胞活性，流式细胞术检测细胞凋亡，免疫荧光对心肌细胞内LC3进行染色，蛋白免疫印迹法检测自噬相关蛋白(Sfrp1、p62、atg5、Beclin1、LC3)和Wnt/β-catenin通路相关蛋白(β-catenin、Dvl-1、Wisp1)表达。结果：aav9-Sfrp1组Sfrp1 mRNA表达水平高于aav9-NC组(P<0.01)。aav9-NC组细胞存活率低于control组，aav9-Sfrp1组细胞存活率高于aav9-NC组(P<0.01)。aav9-NC组细胞凋亡率高于control组，aav9-Sfrp1组细胞凋亡率低于aav9-NC组(P<0.01)。aav9-NC组LC3荧光染色强度低于control组，aav9-Sfrp1组LC3荧光染色强度高于aav9-NC组。aav9-NC组p62、LC3Ⅰ/Ⅱ表达高于control组，atg5、Beclin1表达低于control组(P<0.05)；aav9-Sfrp1组p62、LC3Ⅰ/Ⅱ表达低于aav9-NC组，atg5、Beclin1表达高于aav9-NC组(P<0.01)。aav9-NC组β-catenin、Dvl-1和Wisp1表达高于control组(P<0.001) ......