谢小芳 赵展庆 符妹垂

    摘要 目的： 探究长链非编码RNA(LncRNA)FGD5反义RNA1(FGD5.AS1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡的影响以及对微小RNA.16.5p/cAMP响应元件结合蛋白1(miR.16.5p/CREB1)轴的调节机制。 方法： 将H9c2细胞分为对照组和H/R组(缺氧6 h，复氧6 h)，然后将H/R组细胞分别进行转染，分为oe.NC组、oe.FGD5.AS1组、oe.FGD5.AS1+miR.16.5p mimic.NC组、oe.FGD5.AS1+miR.16.5p mimic组。实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应法(RT.qPCR)检测细胞中FGD5.AS1、miR.16.5p、CREB1的mRNA水平；蛋白免疫印迹(Western Blot)法测定裂解凋亡蛋白酶.3(cleaved Caspase.3)、B细胞淋巴瘤/白血病.2(Bcl.2) 和Bcl.2相关X蛋白(Bax)蛋白表达；CCK.8法测定细胞存活率；流式细胞术检测细胞凋亡率；双荧光素酶活性实验分别验证miR.16.5p 和FGD5.AS1、CREB1的靶向关系。 结果： 与对照组比较，H/R组细胞中FGD5.AS1和CREB1的mRNA水平、细胞存活率、Bcl.2蛋白表达降低( P <0.05)，miR.16.5p mRNA水平、细胞凋亡率及cleaved Caspase.3、Bax蛋白表达升高( P <0.05)；与H/R组和oe.NC组比较，转染过表达FGD5.AS1基因的H9c2细胞中FGD5.AS1和CREB1的mRNA水平、细胞存活率、Bcl.2蛋白表达增高，凋亡率及miR.16.5p、cleaved Caspase.3、Bax水平下降( P <0.05)。双荧光素酶活性实验验证了FGD5.AS1、CREB1均与miR.16.5p有结合位点 ......