潘娟 王琪 田艳妮

    摘要? 目的：甘草甜素(Gly)调节高迁移率族蛋白(HMGB1)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)信号通路对高糖诱导的心肌细胞凋亡和自噬的影响。方法：体外培养大鼠心肌细胞H9c2，将其分为7组：对照组、高糖组、高糖+Gly组、高糖+pcDNA3.1空载体组、高糖+pcDNA3.1-HMGB1组、高糖+Gly+pcDNA3.1空载体组、高糖+Gly+pcDNA3.1-HMGB1组。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活力；V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)法检测细胞凋亡率；透射电镜观察细胞自噬；蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病基因-2相关X蛋白基因(Bax)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)和Beclin-1凋亡、自噬相关蛋白表达；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平；2，7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法检测活性氧(ROS)水平；实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测HMGB1、RAGE mRNA表达水平。结果：与对照组比较，高糖组H9c2细胞活力下降，细胞凋亡率、自噬小体数量及Bax、LC3、Beclin-1蛋白表达增加，IL-1β、TNF-α、ROS水平及HMGB1、RAGE mRNA表达增加，差异均有统计学意义(P<0.05)；与高糖组比较，高糖+Gly组H9c2细胞活力升高，细胞凋亡率、自噬小体数量及Bax、LC3、Beclin-1蛋白表达减少，IL-1β、TNF-α、ROS水平及HMGB1、RAGE mRNA表达减少，差异均有统计学意义(P<0.05)；与高糖+Gly组比较，高糖+Gly+pcDNA3.1-HMGB1组H9c2细胞活力下降，细胞凋亡率、自噬小体数量及Bax、LC3、Beclin-1蛋白表达增加 ......