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编号:2292145
黄芪甲苷通过高尔基体应激调控高糖诱导RGC-5细胞氧化应激、凋亡、自噬的机制研究
http://www.100md.com 2024年12月31日 中西医结合心脑血管病杂志 2024年第16期
糖尿病视网膜病变
    

    摘要" 目的:探究黄芪甲苷对高糖诱导RGC-5细胞氧化应激、凋亡、自噬的影响,并探究其与高尔基体应激之间的关系。方法:将不同浓度葡萄糖(5、35 mmol/L)处理的RGC-5细胞设为正常(NG)组、高糖(HG)组;不同浓度黄芪甲苷(20、40、60、80、100 μmol/L)处理高糖RGC-5细胞,筛选最适浓度60 μmol/L。将si-NC、si-高尔基磷蛋白3(GOLPH3)转染至高糖和黄芪甲苷共处理的RGC-5细胞,设为黄芪甲苷+si-NC组、黄芪甲苷+si-GOLPH3组。细胞计数试剂盒(CCK8)检测细胞存活率;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD);免疫荧光法检测细胞活性氧(ROS);膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙锭(Annexin V-FITC/PI)双染法检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹(Western Blot)实验检测细胞微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3Ⅱ)、细胞微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(LC3Ⅰ)、自噬蛋白(p62)、高尔基体外膜蛋白(GOLPH3)的蛋白表达;实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)实验检测GOLPH3表达 ......

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