活络通脑片对大鼠脑缺血再灌注损伤的治疗作用
对模型,海马,1材料,1实验动物,2仪器,3试药,2方法,1造模及神经学评分标准,2分组及给药,3神经学评分,4行为学观察,5血小板聚集实验,6免疫组化实验,7脑部病理检查,8数据统计,3结果,1HRT对模型大鼠神经
林艳霞,张胜杰,耿海局,王权,马仁强,陈健文*(.深圳市健元医药科技有限公司,广东 深圳5888;.中山大学药学院,广州 50006)脑卒中俗称中风,是一种严重威胁人类生命健康的神经系统疾病,具有高发病率、高致死率和高致残率的特点。脑卒中死亡率已超过缺血性心脏病、肺癌、慢性阻塞性肺疾病和肝癌,仅次于恶性肿瘤,每年大约有2200 万人发病[1]。脑卒中主要包括缺血性脑卒中、出血性脑卒中和蛛网膜下腔出血,以缺血性脑卒中最为常见(占87%[2]),其中患者病后残疾率高达25%[3]。目前,关于缺血性脑卒中的治疗指南推荐的方法包括溶栓、脑神经元保护、降低颅内压、抗凝、抗血小板聚集、降纤、脑血管支架植入、康复及心理治疗、改善脑循环等,后续治疗药物却相对有限。因此,研发疗效确切的新药十分必要。
我国传统中医药源远流长,具有本身独特的理论体系和疗效优势。活络通脑片是一种依据传统中医药理论组方,利用现代化技术手段制成的中成药片剂。本研究拟利用大鼠脑缺血再灌注模型来考察活络通脑片的药理作用,探究其对大鼠脑缺血的治疗作用,为后期开发应用提供药理学依据。
1 材料
1.1 实验动物
SPF 级雄性Wistar 大鼠[南方医科大学实验动物中心,许可证号:SCXK(粤)2016-0041,200 ~240 g],饲养于中山大学实验动物中心屏障系统,实验动物使用许可证号:SYXK(粤)2016-0112。
1.2 仪器
电热恒温干燥箱(长沙医疗器械厂,101-4A);AB104S 电子天平、SB32000电子天平(METTLER TOLEDO);脱水机(TP1020)、石蜡包埋机(EG1160)、切片机(RM2155)、生物荧光显微镜(DM5000B)(Leica);血小板聚集仪(上海医大仪器厂,QX-200);大鼠MCAO 专用栓线(北京沙东生物技术公司,2432-AAA)等。
1.3 试药
活络通脑片提取物干粉(未醇沉工艺样品,HRT,批号:16070601,中山大学药学院);银杏叶片(深圳海王药业,批号:20160102)。BSA(Sigma公 司),羊 抗 兔-IgG(Abcam,ab97049),SABC(博士德公司),DAB 显色试剂盒(Roche),血小板活化因子(PAF,SIGMA),bFGF 抗体(Abcam,ab108319),BDNF 抗体(Abcam,ab106245)等。
2 方法
2.1 造模及神经学评分标准 ......
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