西南鬼灯檠UPLC-ECD指纹图谱建立及聚类分析、主成分分析
药材,1仪器与试药,2试药,2方法,1色谱条件,2溶液的制备,3方法学考察,3结果与分析,1UPLC指纹图谱的生成与相似度,共有峰相关性分析,2聚类分析,3主成分分析,4讨论,1提取条件的优化,2检
张萍,罗敏,胡克特,王颖,顾丁,陈荣祥(遵义医科大学,基础医学院,贵州 遵义 563000)西南鬼灯檠(Rodgersia sambucifolia),为虎耳草科植物的干燥根茎,俗称为岩陀,分布于云南、贵州、四川等地,是白族、苗族及傈族等民族常用的特色药材,白族人称为散药,傈族人称为埃陀[1]。西南鬼灯檠根茎中含有多种成分,如岩白菜素、槲皮素、山柰酚等黄酮类成分[2-4]。其中岩白菜素又称虎耳草素,具有镇咳化痰的功效,在临床上多用于慢性支气管炎等呼吸道系统疾病的治疗,除此之外还具有活血调经及祛风除湿的作用,对跌打损伤、骨折、风湿性关节炎、月经不调、刀伤出血等疾病疗效颇佳。现代药理学研究表明,西南鬼灯檠的提取物中具有抗氧化、抗心律失常、肝保护、抗炎、抑制免疫作用的功效[5-8]。
指纹图谱是以系统的化学成分研究和药理学研究为依托,以系统的、较强的选择性来特征性地区分中药的真伪与优劣,将样品指纹图谱与建立起来的对照指纹图谱进行相似性比较,从而对药品质量进行评价和控制[9-12]。超高效液相色谱(UPLC)借助于高效液相色谱(HPLC)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、以非常低的系统体积及快速检测手段等全新技术,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量,与HPLC 相比,它缩短了分析时间、减少了溶剂用量,同时降低了分析成本。采用UPLC 绘制中药材指纹图谱可以大幅度缩短分析时间,有效弥补了常规HPLC 耗时较长的缺点。电化学检测器(electrochemical detect,ECD)是测量物质的电信号变化,可选择性地检测具有氧化还原性质的化合物,如带有硝基、巯基、酚羟基等基团的有机化合物[13]。近几年关于西南鬼灯檠成分含量研究比较少,且测定成分单一,也并未进行不同产地西南鬼灯檠的成分比较与质量分析,使用液相方法测定其成分多采用荧光检测或者紫外检测器,使用ECD 测定并未见报道[8,14]。以岩白菜素为代表的酚类化合物是西南鬼灯檠的主要活性成分,相较于现有的检测方法,超高效液相色谱联合电化学检测器(UPLC-ECD)更加灵敏、准确,且减少了检测时间,降低了分析成本。本研究采用UPLC-ECD建立了不同产地西南鬼灯檠药材的指纹图谱,并对不同产地的西南鬼灯檠样品进行聚类分析和主成分分析,找寻样品间的差异并分析其中的原因。通过以上研究,期望能够发现不同产地的西南鬼灯檠药材中活性成分的含量差异,为更加全面地评价西南鬼灯檠药材质量提供方法,为西南鬼灯檠药材资源的开发和利用提供数据参考。
1 仪器与试药 ......
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