黎权方，李龙宽，顾军荣，赵月涵，陈应强(.贵州医科大学临床医学院，贵阳 550004；.贵州医科大学第三附属医院药学科，贵州 都匀 558000；3.贵州医科大学第三附属医院感染科，贵州 都匀 558000)

    肝纤维化(liver fibrosis，LF)是慢性肝病发生发展过程中肝内细胞外基质(extracellular matrix，ECM)合成增加、降解相对不足引起异常沉积所发生的一种病理改变[1]。肝纤维化发生发展的关键环节是肝星状细胞(hepatic stellate cell，HSC)的激活[2]。多种细胞因子可促进肝纤维化的发生、发展，其中血小板衍生生长因子(PDGF)是一种关键的促HSC 激活和迁移的纤维化细胞因子，介导肝纤维化的进程。随着组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase，HDAC)抑制剂广泛应用于器官纤维化及癌症的治疗[3-4]，肝纤维化的组蛋白修饰也成为了当前研究的热点。研究发现HDAC 抑制剂可延缓肺纤维化的发生及发展，调控肌纤维细胞活化、增殖和ECM 蛋白的生成，通过染色质重塑等减轻肾脏纤维化的发生[5-7]。伏立诺他(suberoylanilide hydroxamic acid，SAHA)，是一种广谱HDAC 抑制剂，本实验拟通过观察伏立诺他对PDGF 刺激的HSC-T6 的增殖、迁移及细胞周期相关基因、蛋白和COLⅠ的影响，考察其抗肝纤维化作用。

    1 材料

    1.1 细胞

    大鼠肝星状细胞HSC-T6 [Merck(中国)，货号：SCC069]。

    1.2 试药

    DMEM/高糖培养基及胎牛血清(FBS)(美国Gibco 公司)；PDGF-BB(日本Takara 公司)；伏立诺他(货号：SML0061，规格：5 mg，白色粉末，分子量：264.32，Sigma 公司)；胰蛋白酶、RIPA缓冲液(美国Sigma 公司)；CCK-8 试剂盒(日本Dojindo 公司)；甲醇(国家标准溶液定制中心)；Trizol(日本Takara 公司)；Bestar RT-qPCR kit 及Bestar RT-qPCR MasterMix(DBI 公司)；一抗稀释液、二抗稀释液、SDS-PAGE、PVDF 膜(美国Millipore 公司)；COLⅠ抗体、CyclinD1、CyclinE1 抗体(美国Abcam 公司)；GAPDH 抗体(美国 Santa Cruz Biotechnology 公司) ......