桂孟玹，黄彬，王瑞国，林久茂*(1.福建中医药大学中西医结合研究院，福州 3501；.福建中医药大学药学院，福州 3501；3.福建省中西医结合老年性疾病重点实验室，福州 3501；4.中西医结合基础福建省高等学校重点实验室(福建中医药大学)，福州 3501)

    结直肠癌(CRC)是人类最常见的恶性肿瘤之一，其发病率越来越高，目前已成为世界第三大高发癌症[1]。CRC 的发生和炎症密切相关，促炎细胞因子的过度分泌可以促进肿瘤的发展和转移[2-3]。近年来研究表明，白介素 6 (interlenkin-6，IL-6)及其受体的信号通路参与了CRC 的发生、发 展[4-5]。IL-6 与IL-6 受 体(IL-6R)的 结合会启动细胞内信号传导级联反应，从而激活转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)增强局部炎症环境，STAT3 持续的激活会引起肿瘤细胞的增殖、凋亡失衡，进一步促进肿瘤进展[6]。

    当前CRC 的治疗主要通过手术切除并配合化疗药物以提高生存率，并降低术后的肿瘤复发和转移，但由于化疗药物对正常细胞亦具有杀伤作用，容易引起严重的毒副反应，导致患者的生存质量下降[7-8]。目前，已有研究报道使用中草药辅助抗肿瘤，并取得了不错的效果[9-10]。白花蛇舌草是目前已有应用于辅助治疗CRC 的中草药，其主要药效成分齐墩果酸(oleanolic acid，OA)是一种五环三萜类化合物，具有显著的抗炎、抗肿瘤、护肾、保肝等作用[11-14]。近年来，基于具有明确药效的中草药，从其中发掘中草药药效活性成分并开发成单体药物是当前中西医结合临床治疗重大疾病的热点。有研究表明，OA 对多种恶性肿瘤细胞具有抑制增殖的作用，但其药效功能研究尚未完全阐明，药效作用机制有待进一步明确[15]。因此，本研究以人结肠癌HT-29 细胞为对象，评价OA 对HT-29 细胞的增殖和凋亡的影响，并通过研究OA 对IL-6/STAT3 信号通路的调控作用，为该化合物防治结肠癌提供理论研究基础。

    1 材料

    1.1 试药

    齐墩果酸(OA，批号：O5504)、白介素 6(IL-6，批号：I1395)(美国Sigma 公司)；人结肠癌HT-29 细胞(中国科学院细胞库)。DMEM 培养基(批号：SH30022.01)、胎牛血清(FBS，批号：10099-141)、青霉素-链霉素(批号：15070063)、胰蛋白酶-EDTA(批号：25200-056)、TRIzol 试剂(批号：12183555)、Caspase-3 活力试剂盒(批号：037-100)(美国Invitgen 公司)；抗Bcl-2、Bax、CyclinD1、CDK4、p15、p-STAT3、STAT3、β-actin 单克隆抗体及辣根过氧化物酶(HRP)偶联的二抗(Cell Signal Technology 公司 ......