易佩佩，赵英琦，丁吉雪，陈文君，陈婉榕，王梦璇，吕元明(桂林医学院公共卫生学院，广西 桂林541000)

    乳腺癌(breast cancer)是女性发病率最高的肿瘤，同时也是女性肿瘤相关死亡的主要原因之一[1]。乳腺癌的复发与转移是导致患者死亡的主要原因，研究发现高达70%的淋巴结阳性和高达30%的淋巴结阴性乳腺癌会在治愈后复发[2]，而更严重的是肿瘤一旦发生转移，中位生存期仅为2 ～3年，这是目前临床治疗面临的一大难题。

    染料木黄酮(genistein，GEN)是异黄酮类化合物，在豆荚类植物中广泛存在，属于植物雌激素的一种，具有抗氧化、保护心血管、预防骨质疏松、抗肿瘤等药理作用，还可作为辅助化疗药发挥作用[3-4]。已有研究证明GEN 通过NF-κB和AKT 途径抑制乳腺癌细胞增殖，还与乳腺癌中雌激素受体结合从而对相关炎症基因产生影响[5]。上皮间质转化(EMT)在癌症中被广泛研究，并被认为在侵袭、转移、化疗耐药性和与癌细胞侵袭性有关的过程中起着至关重要的作用[6]，但GEN 在调节乳腺癌细胞EMT 过程方面的作用仍不清楚。因此本实验从EMT 过程探究GEN 对两种乳腺癌细胞生物学特性的影响及相关分子机制，探讨GEN 抗乳腺癌的作用机制，为乳腺癌的临床治疗提供新思路。

    1 细胞与试药

    MCF-7 细胞和MDA-MB-231 细胞(American Type Culture Collection，ATCC)；GEN、CCK-8试剂盒(美国MCE)；DMEM 培养基、胎牛血清(美国Gibco)；线粒体膜电位与细胞凋亡检测试剂盒(中国碧云天)；ECL 超灵敏化学发光检测试剂盒(上海雅酶)；DMSO(美国Sigma)；4%多聚甲醛(美国Solarbio)；β-actin、羊抗鼠二抗、羊抗兔二抗(北京中杉金桥)；Caspase 3、BAX、Bcl-XL、Bcl2(武 汉Proteintech)；E-钙调蛋白(E-Cadherin)、Vimentin、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)(美 国CST)；Twist、MMP-2、MMP-9、Snail、Slug(英国ABcam)。

    2 方法

    2.1 细胞增殖实验

    取对数生长期细胞，以每孔200 μL(约含5000 个细胞)接种于96 孔板内，每组设置3 个复孔。次日，吸出孔内培养基，按组别分别加入100 μL 配好含0[对照组(control)]、12.5、25、50 μmol·L-1GEN 的培养基 ......