白花蛇舌草内生真菌的分离与鉴定
孢属,1材料,2方法,1内生真菌的分离与纯化,2内生真菌的鉴定,3结果,1白花蛇舌草内生真菌的鉴定,2白花蛇舌草内生真菌系统发育分析,4结论与讨论
赵作威,叶颖晓,刘明爽,文春南,王旭光,刘淼*,麻兵继,*(.河南农业大学 中药材系,郑州 450046;.河南白云牧港生物科技有限公司,河南 登封 45400)白花蛇舌草(Hedyotis diffusaWilld.)是茜草科耳草属植物[1],全草入药,具有清热解毒、利湿通淋等功效[2]。在我国安徽、云南以及两广地区均有分布[3]。白花蛇舌草在中医临床上常与其他药物配合使用以治疗各种癌症以及各种炎症,尤其在治疗恶性肿瘤方面是最常用的中药材之一[4-5]。因此,近年来,国内对白花蛇舌草的需求量剧增,导致野生资源逐渐减少[6]。为了满足市场需求,现多进行人工栽培。目前,白花蛇舌草在河南省确山县人工栽培规模较大,年产量约占全国总产量的一半,现已成为河南大宗药材之一[7]。
近年来,国内外学者对白花蛇舌草开展了大量研究,主要聚焦于栽培技术[8]、化学成分[9-10]、提取工艺[11]、质量标准[12-13]和药理作用[14-15]等方面。而对其内生真菌的研究尚未见文献报道。植物内生真菌是结构丰富多样、生物活性广泛的次生代谢产物的重要来源,在药物研发、植物病害防治等方面具有重要作用[16]。此外,有些药用植物内生真菌可产生与寄主植物相同或相似的活性物质,能够促进寄主植物次生代谢产物的形成和积累,提高活性成分的产量[17-19]。本研究对采自河南确山县的白花蛇舌草进行内生真菌的分离和鉴定,探究其内生真菌的种群结构,为进一步挖掘白花蛇舌草内生真菌及其活性次生代谢产物奠定基础。
1 材料
健康无病害的白花蛇舌草植株于2018年10月采自河南省确山县基地,经河南农业大学李贺敏副教授鉴定为Hedyotis diffusaWilld.。LDZF-50kB 立式压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂);SW-CJ-2D 型超净工作台(名牌之星);QHZ-98A 全温震荡摇床(太仓市华美生化仪器厂);GXZ 型(多段编程)智能光照培养箱(宁波江南仪器厂);H1650-W 台式微量离心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司);PCR 仪(北京东胜创新生物科技有限公司);电泳仪(JY300C通用型电源 ......
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