吴殷囡，汪玉馨，杜益，杨方秀，宗卫峰，孟长虹，谭力，陆益红*(.徐州医科大学药物分析教研室，江苏 徐州 004；.江苏省食品药品监督检验研究院，南京 009；.浙江省中医院药剂科，杭州 0006)

    对乙酰氨基酚(APAP)的过量使用易致严重的肝损伤甚至死亡，因此APAP 及其代谢产物的研究和监测对于肝损伤风险的防范尤为重要。近年来，国内外研究者对于APAP 的体内过程及其毒性产物、转化过程等方面研究较为充分。正常剂量下，APAP 进入体内后经CYP450 酶代谢生成活性中间体N-乙酰-对-苯醌亚胺(NAPQI)，其在谷胱甘肽转移酶的作用下生成谷胱甘肽结合物而排出体外。但当过量服用APAP 时，因NAPQI 在体内大量产生而耗竭谷胱甘肽(GSH)，过量的NAPQI 则会结合肝细胞蛋白从而导致肝细胞损伤[1-5]。

    在中药配伍减毒增效的研究中发现，药物联用产生的减毒作用主要表现在对药物体内过程的影响，通过影响药物及其毒性产物的体内过程(包括吸收、代谢及排泄等)，从而影响药物的毒性[6]。课题组前期研究发现，柴胡及其制剂正柴胡饮对APAP 所致的肝损伤有预保护作用，从药动学角度来看，推测柴胡预保护作用的发挥可能与降低APAP 的入血浓度或减少APAP 毒性相关代谢产物NAPQI 的产生有关[7]。

    因此，本实验以APAP 及其毒性相关代谢产物为研究对象，建立HPLC-MS/MS 检测法，通过柴胡水提液预给药后给予APAP，考察柴胡水提液对APAP 代谢物转化的影响，以期为APAP 及其毒性相关代谢产物的测定及后续机制研究提供参考。

    1 材料

    1.1 仪器

    高效液相色谱仪-三重四极杆质谱仪，包括Finnigan TSQ Quantum Discovery Max 系统Xcalibur 1.2 数据采集软件和LCQuan 数据处理软件(美国Thermo 公司)；XP6 型/XS205DU 型电子天平(瑞士梅特勒公司)；ZH-2 型自动涡旋混合器(天津药典标准仪器厂)；真空离心浓缩挥干仪(美国Thermo 公司)；L-550 台式低速离心机(湖南湘潭离心机有限公司)；Beckman Coulter Allegra 64R 台式高速冷冻离心机(美国贝克曼库尔特有限公司)；超纯水机(美国Millipore 公司)。

    1.2 试药

    对乙酰氨基酚[APAP，纯度≥ 99%，批号：G1816129，阿拉丁试剂(上海)有限公司]；对乙酰氨基酚葡萄糖醛酸钠盐(APG ......