叶下珠水提物通过NF-κB信号通路改善脂多糖诱导的大鼠神经炎症模型的认知功能障碍
海马,批号,神经元,1材料,1实验动物,2试药,3仪器,2方法,1药材的制备,2动物分组,给药及造模,3Morris水迷宫,4大鼠脑冰冻切片制备及尼氏染色,5ELISA法检测IL
闫世玉,许立伟,黄彩图,陶婷婷,梁美,何建福,陈玲琳*(.桂林医学院药学院,广西 桂林 5499;.桂林医学院科学实验中心,广西 桂林 5499)神经炎症是中枢神经系统先天性的免疫反应[1],其产生的原因是机体受损后,中枢神经系统的促炎因子和抗炎因子分泌失调[2]。神经炎症可能参与神经退行性疾病,如阿尔茨海默病的病理生理过程[3]。因此,探讨神经炎症在大脑中的变化及机制,可以为神经退行性疾病的研究提供参考依据。
叶下珠又名珍珠草,为大戟科叶下珠属植物叶下珠(Phyllanthus urinariaL.)干燥全草,具有清肝明目、消炎解毒等功效[4]。研究发现,该植物含有丰富的黄酮类化合物,除了抗肿瘤的作用外[5],在肝肾炎症中也具有明显的作用[6]。但是,叶下珠在神经炎症中的作用尚未明确。本实验通过侧脑室注射脂多糖(LPS),建立LPS 大鼠神经炎症模型,观察叶下珠水提物(aqueous extract ofPhyllanthus urinariaL.,AEP)对LPS大鼠学习记忆能力及NF-κB 信号通路的影响,探讨AEP对炎症模型大鼠的保护机制,为叶下珠治疗神经炎症提供理论基础。
1 材料
1.1 实验动物
8 周雄性SPF 级SD 大鼠,体质量250 ~290 g [湖南斯莱克景达生物科技有限公司,许可证号:SCXK(湘)2019-0004]。大鼠饲养于桂林医学院动物实验中心,温度22 ~24℃,湿度50%~80%,12 h 明暗交替光照。食物和饮用水不受限制。动物饲养、使用符合桂林医学院实验动物委员会规定。
1.2 试药
叶下珠(广西省桂林市六合路药材市场,经陈玲琳老师鉴定为大戟科植物叶下珠干燥全草)。IL-1β试剂盒(批号:E-EL-R0012c)、TNF-α试剂盒(批号:E-EL-R2856c)(Elabscience 公 司),NF-κB(批号:4814S)、p-NF-κB(Ser536)(批号:8214)、IκB-α(批号:8242S)、p-IκB-α(Ser32,Ser36)(批号:8219)(Cell Signaling Technology 公 司),GAPDH(Abcam 公司,批号:ab181602-10),辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(H +L)(批号:A0208)、BCA 试剂盒(批号:P0012)(上海碧云天生物技术公司) ......
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