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编号:619978
高效液相色谱法测定半枝莲不同富集方法所得总黄酮的含量
http://www.100md.com 2021年5月6日 中南药学 2021年第4期
草素,木犀,浸膏,1仪器与试药,2方法与结果,1半枝莲总黄酮的提取,2供试品溶液的制备,3对照品溶液的制备,4色谱条件,5系统适用性试验及专属性试验,6线性关系考察,7精密度试验,8重复性试验,9稳定性试验
     胡倩莲,张婕妤,2,梅格格,李竹君,李心怡,田雅,方振峰*(.江汉大学医学院药学系,武汉 430056;2.中南民族大学药学院,武汉 430074)

    中药材半枝莲(Scutellaria barbataD.Don),别名狭叶韩信草、并头草,最先见于《药镜拾遗赋》[1],为唇形科植物半枝莲的全草,常于夏季、秋季其茎叶茂盛时采挖。本品味辛、苦、性寒,归肺经[2],具有清热解毒、活血祛瘀、消肿止痛、抗肿瘤等功能[3]。半枝莲主要化学成分为生物碱、黄酮和多糖等[4],其中黄酮类成分是半枝莲抗肿瘤作用的主要活性成分之一,因其抗肿瘤作用机制的多样化[5-8],引起了科研工作者的极大兴趣。

    目前关于半枝莲中总黄酮含量的测定已有一些文献报道,主要为以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法测定总黄酮含量[9-10];或以黄芩苷为含量指标,用高效液相色谱(HPLC)法测样品中总黄酮含量[11-12]。文献报道[3,5-7]半枝莲总黄酮中黄芩苷、木犀草素、野黄芩苷、芹菜素等单体成分表现出良好的抗肿瘤活性,其中野黄芩苷的含量最高[13-14],因此,研究半枝莲总黄酮富集方法时,需考虑同时将几种活性较好的黄酮单体成分的含量作为考察指标。文献中常见的总黄酮的富集方法主要集中于大孔吸附树脂法,但对于经典的总黄酮富集方法如碱提酸沉法,很少有报道,也很少有不同方法之间的对比。

    本试验以抗肿瘤活性较好的单体成分木犀草素、野黄芩苷、芹菜素等含量之和为总黄酮含量指标,通过优化HPLC 条件,建立测定半枝莲黄酮成分的方法。通过比较3 种总黄酮富集方法(溶剂萃取法、碱提酸沉法和大孔树脂吸附法),探寻富集半枝莲具有抗肿瘤作用的黄酮成分的最佳方法,以期为半枝莲的进一步开发利用提供基础。

    1 仪器与试药

    ME104E 电子天平[精度:0.0001 g,梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司];AUX120D 分析天平(精度:0.01 mg)、UV-6780 紫外可见分光光度计[岛津国际贸易(上海)有限公司];超声波清洗器(昆山美美超声仪器有限公司);真空旋转蒸发器(上海申生科技有限公司);SHZ-D(Ⅲ)循环水式多用真空泵(上海秋佐科学仪器有限公司);XFB-200 中药粉碎机(湖南省吉首市中州机械厂);安捷伦1220 高效液相色谱仪(安捷伦公司);DHG-9030A 电热恒温鼓风干燥箱(上海圣科仪器设备有限公司)。

    色谱乙腈、甲醇(国药集团化学试剂有限公司);水为自制的重蒸水;HE-802 型大孔吸附树脂(上海华震科技有限公司);木犀草素(纯度≥99.6% ......

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