李艺文，唐志书*，张珍*，梁涛，宋忠兴，王昌利，，马虎强，王宇鹏(.陕西中医药大学 陕西省中药资源产业化省部共建协同创新中心/秦药特色资源研究开发国家重点实验室(培育)/陕西中药产业技术研究院，陕西 咸阳 708；.陕西海天制药有限公司，陕西 咸阳 7046；.内蒙古海天制药有限公司，内蒙古 通辽 08000)

    慢性肾脏疾病(chronic kidney disease，CKD)是指由于各种原因引起的慢性肾脏结构和功能障碍，包括各种原发的、继发的肾小球肾炎、肾小管损伤和肾血管的病变等，其特点是发病率高、伴发的心血管患病率高、病死率高[1]。肾脏纤维化是CKD的主要病理基础。目前研究认为肾脏纤维化不可逆，临床上用于治疗的药物主要分为血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素受体拮抗剂两大类，但是治疗效果不佳，且伴随一系列的不良反应[2]。因此，寻找有效减缓肾脏纤维化的药物已成为CKD治疗的关键。

    沙棘总黄酮(total flavonoids of hippophae，TFH)是从沙棘(Hippophae rhamnoidesLinn.)中提取的有效活性成分，主要含有槲皮素、异鼠李素及山柰酚等[3]。近年多项研究发现，槲皮素可改善单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstructive，UUO)大鼠肾功能，具有抗UUO大鼠肾脏纤维化的作用[4-6]；异鼠李素具有抗肝脏纤维化和肺纤维化的作用[7-9]；因此，推测沙棘总黄酮可能具有抗肾脏纤维化的作用。本研究拟建立UUO大鼠肾脏纤维化模型，研究沙棘总黄酮对UUO大鼠肾脏纤维化的影响，并探讨其作用机制。

    1 材料

    1.1 动物

    SPF级雄性SD大鼠，体质量(200±10)g [成都达硕实验有限公司，动物生产许可证号SCXK(川)2020-030]。

    1.2 试药

    沙棘总黄酮(陕西海天制药有限公司，以异鼠李素为标准，沙棘总黄酮含量为30%)；α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、钙黏附蛋白-E(E-cadherin)、细胞间隙连接蛋白(Cx43)(美国Cell Signaling Technology公司)；纤维连接蛋白(Fibronectin)(美国Santa Cruz biotechnology公司)；转化生长因子-β1(TGF-β1)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)(中国Proteintech公司)；HRP标记山羊抗小鼠二抗、山羊抗兔二抗、RIPA(强)裂解液(上海碧云天生物技术有限公司)；BCA蛋白定量试剂盒(陕西中晖赫彩生物医药科技有限公司)；内源性H2S检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)；PVDF膜(美国Merck Millipore公司) ......