壮药矮陀陀含药血清通过激活Bax/Caspase-3诱导H22凋亡
室温,空白对照,1材料,1细胞与动物,2试药,3仪器,2方法,1矮陀陀含药血清制备,2H22细胞培养,3MTT法检测细胞增殖情况,4AnnexinV-FITC,PI流式细胞术检测细胞凋亡情况
陶林,吴霜,文建文,韦立志(.广西医科大学第二附属医院 药物临床试验机构办公室,南宁 530007;.广西中医药大学第一附属医院药学部,南宁 530007;3.广西医科大学第二附属医院药学部,南宁 530007)肝癌新发病例全球每年约有78万,其死亡率仅次于肺癌,排名第二[1]。我国肝癌的5年生存率仅为10.1%,一经确诊已为晚期[2]。肝癌患者主要以放疗、化疗为最主要的有效治疗手段。顺铂因抗瘤谱广、疗效显著已经成为治疗多种恶性肿瘤的临床一线用药,其抗肿瘤作用与DNA损伤和DNA合成抑制相关,主要通过激活细胞凋亡,最终导致肿瘤细胞死亡。近年来中医药在肿瘤治疗方面取得了较好的成果[3]。壮药矮陀陀原植物(Munronia henryi)又称小地黄连、小独根、千年矮、思茅地黄连等,其味甘微苦,性凉,具有清热解毒、活血止痛的功效。广西民间常用其全草臼烂水煎内服治疗腹痛、风湿痛等[4],还可用于治疗跌打瘀痛、感冒发热、咽喉炎、痈肿疔疮[5]。刘越滇等[6]发现矮陀陀乙醇提取物具有镇痛、抗炎活性。Lin 等[7]发现矮陀陀提取物具有抑菌活性,其中mulavanin D和2α,3α,15β-trihydroxy-20(S)-tigloyl-pregnane对红色毛廯菌的MIC(最低抑菌浓度)分别为 25、50 μg·mL-1。此外,矮陀陀具有抗病毒活性,能抑制烟草花叶病毒(TMV)的复制。Yan等[8]发现矮陀陀中分离所得柠檬苦素衍生物具有抗肿瘤活性,能显著抑制HL-60、H22、A-549、MCF-7、SW480 等5种癌细胞株增殖。Qi等[9]的研究表明矮陀陀提取物具有较强的抗肿瘤活性,能够抑制肺癌细胞A549的增殖(抑制率32.8%),并诱导肿瘤细胞凋亡。矮陀陀在体内是否具有抗肿瘤活性尚未见报道,本研究拟探究矮陀陀含药血清对小鼠肝癌H22细胞株的增殖影响及机制,阐明矮陀陀的抗肿瘤活性及可能机制,为其临床应用提供实验依据。
1 材料
1.1 细胞与动物
小鼠肝癌细胞株H22购于中国医学科院肿瘤医院(广西医科大学药理教研室传代保存)。SPF级雄性SD大鼠25只,体质量180~220 g,购于广西医科大学动物实验中心SPF动物房,动物许可证号:SCXK桂2014-0002。
1.2 试药
壮药矮陀陀,采自广西靖西县,由广西中医药大学第一附属医院中药鉴定室文建文主管药师鉴定为楝科植物地黄连属云南地黄连Munronia delavayiFranch.干燥全株,注射用顺铂(江苏豪森药业股份有限公司 ......
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